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上海交通大学医学院
史桂英
第一页,共五十二页。
BD公司不同型号流式细胞仪
FACSCalibur
LSRII
FACSAria
FACSCount
FACSVantage&DiVa
FACSCanto
第二页,共五十二页。
一流式细胞仪的基本原理
*稳定流动
*激发光斑
*荧光补偿
*荧光素选择
二数据分析及开窗
第三页,共五十二页。
FCM原理示意图
第四页,共五十二页。
层流是液体稳定流动的必要条件,管道中层流的形成要满足雷诺数
dρV
Re=<2300,
η
式中ρ、η分别为液体的密度和粘滞系数,d和V分别为管道的直径和液体的平均流速。FCM利用层流技术,使细胞流动稳定,并具有自聚焦作用,为细胞分析分选提供技术保证.
层流技术
第五页,共五十二页。
液流驱动系统(示意图)
流速与压力的关系服从Bernoulli方程,即P=(1/2)V2
(忽略高度的变化)。改变气压,就可获得不同的流速。
第六页,共五十二页。
第七页,共五十二页。
低速高速不同样本速率形成的样本流
第八页,共五十二页。
激发光源与光束成形系统
第九页,共五十二页。
.
20um
64um
32um032um
聚焦距离
激光束
聚焦透镜
强度
光束成形与细胞受照方式
这种椭圆形光斑的检测区保证每个细胞分别受到光照且受检时受到一致的光照FCM的单细胞照明技术
第十页,共五十二页。