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中护微生物实验-免疫学试验.ppt

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中护微生物实验-免疫学试验.ppt

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中护微生物实验-免疫学试验.ppt

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第一页,共57页。
(一)中性粒细胞的吞噬作用:
实验前1小时小鼠腹腔内注射1ml无菌肉汤
小鼠腹腔内注射白色葡萄球菌1ml,
让小鼠活动45min
颈椎脱臼法处死小鼠,吸取腹腔液涂片
自然干燥,瑞特氏染色后,油镜观察
第二页,共57页。
镜下可见:
中性粒细胞的细胞核染成深紫红色,细胞浆染成淡粉红色,白色葡萄球菌染成深紫色。如图
第三页,共57页。
(二)巨噬细胞的吞噬作用:
前三天给小鼠腹腔内注射淀粉肉汤1ml
实验当天给小鼠腹腔内注射Hanks液3-4ml后小鼠活动10min
眼球放血后颈椎脱臼处死小鼠
吸取腹腔液滴于载玻片上,
并滴加等量的1%SRBC悬液
玻片置于湿盒内后37℃水浴箱35-40min
取出玻片在盐水中漂洗3次,自然干燥
瑞特氏染色,油镜观察
第四页,共57页。
镜下可见:
巨噬细胞核大,呈椭圆形、肾形或马蹄形。核染色质比较疏松,染成淡紫色,胞浆染成浅灰蓝色。发生吞噬时可见在巨噬细胞胞浆中有一个以上的有核鸡红细胞。如吞噬的鸡红细胞多时则巨噬细胞核被挤到一侧,形态不规则。如图所示
第五页,共57页。
第六页,共57页。
瑞氏染色法:
于玻片上滴加瑞氏染液1-2滴染色1min
滴加4-5滴蒸馏水于玻片上,混匀染色液,染5~10min
流水冲洗,待干后用油镜观察
第七页,共57页。
二、抗原-抗体反应
第八页,共57页。
凝集反应
沉淀反应
抗原性质
颗粒性
可溶性
常见抗原
红细胞、
细菌等
多糖、蛋白质、类脂等
抗原分子量
较大
较小
结果现象
凝集现象
沉淀物
常用实验
试管凝集、玻片凝集等
琼脂扩散、对流电泳、火箭电泳等
第九页,共57页。
(一)凝集反应
实验原理 颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的抗体在体外结合,在一定的条件下,形成肉眼可见凝集小块的反应,称为凝集反应。参与反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。
第十页,共57页。