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一般来说,无论何种类型的细胞工程技术,起始阶段均涉及外植体取材、灭菌、接种与培养等基本过程。
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§1、外植体的选择和灭菌
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一外植体的选择
(一)外植体的基因型
不同种类的植物
同一植物的不同器官
对诱导条件反应是不一致的,有的部位诱导分化的成功率高,有的部位却很难脱分化,或者再分化频率很低
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单子叶植物不易诱导器官发生。
。
(如番茄29%~63%)
。
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外植体种类及基因型
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(二)外植体的部位
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常用的外植体种类:
①茎尖(园艺植物组织培养中应用最多,繁殖率高,不易发生遗传变异,但取材有限)
②茎段(采用嫩茎的切段促进腋芽萌发,取材容易)
③叶(幼嫩叶片组织通过愈伤组织或不定芽分化产生植株,取材容易,操作方便,但易发生变异);
④花球和花蕾
⑤种子、根、块根、块茎、花瓣、胚等。
对于大多数植物来讲,茎尖是最好的部位,由于其形态已基本建成,生长速度快,遗传性稳定,也是获得无病毒苗的重要途径,但茎尖往往受到材料来源的限制,而采用茎段可解决培养材料不足的困难。
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在选择植物外植体进行组织培养时,还要求考虑待培养材料的来源是否有保证,是否容易成苗;同时要考虑到该外植体,特别是经过脱分化产生的愈伤组织,是否会引起不良变异,丧失原品种的优良性状。
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