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专利名称:检测方法
检测方法本发明涉及检测作物种子上存在的农药的方法。尤其是,根据本发明的方法可以用来确保作物种子上存在充足量的农药。基于液相色谱的用于确定柑橘类水果上存在噻菌灵(TBZ)残余物的方法已知自J-AOAC--4月;79(2):579_82。该方法使用荧光检测,然而,在荧光分析之前其需要使样品经受冗长且复杂的液相色谱技术。本发明提供一系列相对现有技术的优势,包括这样的能力在种子处理过程期间或之后快速分析种子样品以确定农药存在并对其定量,不使用液相色谱法。因此,本发明提供相对现有技术的显著改进。根据本发明,提供检测液体样品中存在的杀真菌剂的方法,所述液体样品在种子处理过程期间或之后提取自种子,包括(a)提供待测试的含水和/或有机/含水样品;(b)对所述样品进行电磁辐射,该电磁辐射的波长足以激发杀真菌剂包含的荧光团;(c)检测所述样品中所述荧光团的荧光。在具体实施方式
中,待测试的样品是含水样品。在又一实施方式中,待测试的样品是有机/含水样品。在又一实施方式中,待测试的样品是有机样品。术语"种子"如本文所用包括有性种子和其它类型的植物繁殖材料。例如,有性种子一般包括至少胚和种皮,比如禾谷类和豆科植物种子中存在的那些。一般禾谷类包括,
但不限于,玉米,稻小麦,大麦,和高粱。一般豆科植物包括,但不限于,菜豆,豌豆,和花生。植物繁殖材料包括会繁殖成植物的全部物质。已知繁殖材料的一般实例是插条,例如,马铃薯种子。可用于本发明的有机溶剂的实例包括乙***,醇类比如甲醇,乙醇,丙醇,***类比如***,烃类比如己烷和芳族化合物比如甲苯。如上所述,本发明还提供这样的方法,其中所述荧光的检测使得可以定量所述样品中的杀真菌剂。如上所述,本发明还提供这样的方法,其中激发所述杀真菌剂包含的荧光团的波长是约305nm。在具体实施方式
中所述波长是305nm。如上所述,本发明还提供这样的方法,其中被激发的荧光团发出的荧光信号的波长是约360nm。在又一实施方式中,所述波长是360nm。在所述方法的具体实施方式
中,所述杀真菌剂是噻菌灵。在TheBritishCropProtectionCouncil在2003出版的ThePesticideManual第十三版中,噻菌灵(TBZ)列为790条。TBZ主要作为用于作物上的杀真菌剂为人所知。令人惊讶地,申请人发现TBZ的荧光特征能够用来在种子处理期间及之后计算并定量含有TBZ的杀真菌配制剂的存在和含量。如上所述,本发明还提供这样的方法,其中经由荧光光谱仪检测荧光。如上所述,本发明还提供这样的方法,其中在种子处理过程期间分析所述种子以确保种子包覆有充足量的杀真菌剂。在具体实施方式
中,在种子处理过程之后分析种子以确认种子含有充足量的杀真菌剂。在又一实施方式中,用分析结果来控制在处理过程期间加至种子农药量。本发明还提供确定作物种子上存在的杀真菌剂的量的方法,包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的杀真菌剂施用种子;和(b)自种子提取所施用的杀真菌剂;(C)分析所提取的杀真菌剂中杀真菌剂水平;和(d)基于所提取的杀真菌剂中存在的杀真菌剂水平,推演施用至种子的杀真菌剂水平。本发明还提供确定作物种子上存在的农药量的方法,包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的一种或多种杀真菌剂加至种子;(b)自种子提取至少一种施用杀真菌剂;(c)分析所提取的杀真菌剂中所述至少一种杀真菌剂的水平;(d)基于所提取的杀真菌剂中存在的所述至少一种杀真菌剂的水平,推演施用至种子的至少一种杀真菌剂的水平;并且(e)基于施用至种子的至少一种杀真菌剂的推演水平或者所提取的杀真菌剂中存在的所述至少一种杀真菌剂的水平,将施用至种子的全部杀真菌剂的水平进行关联。本发明还提供确定作物种子上存在的农药量的方法,包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的噻菌灵和一种或多种杀真菌剂或杀昆虫剂加至种子;(b)自种子提取噻菌灵;(c)分析所提取的杀真菌剂中的噻菌灵水平;(d)基于所提取的
噻菌灵中存在的噻菌灵的水平,推演施用至种子的噻菌灵水平;并且(e)基于施用至种子的噻菌灵的推演水平或所提取的噻菌灵中存在的噻菌灵的水平,将施用至种子的杀真菌剂和/或杀昆虫剂的水平进行关联。本发明还提供这样的设备,其包括检测在种子处理过程期间或之后产生的含水样品中存在的杀真菌剂的检测机制,所述设备包括(a)提供待测试的含水样品的机构;(b)对所述样品进行电磁辐射的机构,所述电磁辐射的波长足以激发所述杀真菌剂包含的荧光团;(c)检测所述样品中所述荧光团的荧光的机构。如上所述,本发明还提供这样的设备,其中所述设备还包括进行确定如上所述的种子中存在的杀真菌剂量方法的机构。本发明还提供将荧光检测器用于检测在种子处理过程期间或之后产生的含水样品中的杀真菌剂。在具体实施方式
中,所述检测器是定量检测器。在又一实施方式中,所述杀真菌剂是噻菌灵。在所述方法的又一实施方式中,激发所述杀真菌剂包含的荧光团的波长是约305nm。在所述方法的又一实施方式中,激发荧光团发出的荧光信号的波长是约360nm。在所述方法的又一实施方式中,所述杀真菌剂是噻菌灵。在所述方法的又一实施方式中,所述荧光经由荧光光谱仪检测。本发明还提供进行本发明方法的便携式试剂盒。所述试剂盒可以包括下述项目一个或多个容器,提取流体,超声仪(例如超声浴),稀释溶液,缓冲溶液,移液管,滤光器,
荧光光谱仪,电源,光源,和/或计算机。本发明的优选提取流体一般地是有机溶剂包括,例如乙***,醇类比如甲醇,乙醇,丙醇,***类比如***,烃类比如己烷和芳族化合物比如甲苯。本发明特别优选的提取溶液是甲醇。超声仪是这样的装置,其产生声音能量,一般是超声能量,搅动颗粒并促进自种子的提取。超声仪也称为超声浴或超声探头。可商购的超声仪的一种实例是BransonB1510-MT型。荧光光谱仪和光源是本领域已知的。可商购的光谱仪和光源包括佛罗里达的OceanOpticsofDunedin生产的那些,比如Ocean0pticsPX-2光源和USB4000荧光检测ο现参照下述非限制性实施例进一步定义本发明种子处理分析实施例1用如下配方,%(ColorCoatRedLiquid)0·。通过荧光光谱分析经处理种子用噻菌灵(TBZ)%(IOOOppm)水平的其它杀真菌剂混合处理的已知重量的种子(4克)加入玻璃容器。(),振摇混合物约15分钟。将IOml甲醇加入混合物,再振摇混合物15分钟。。()稀释,超声浓度约Ippm的噻菌灵。将含约IppmTBZ的经稀释的提取物转移至池中,产生
TBZ荧光光谱。记录约360nm处的TBZ荧光强度。溶液中的TBZ浓度由TBZ浓度对照于360nm的TBZ荧光强度的标准曲线来确定。实施例2用下述配方,%噻菌灵的商业种子处理配制
。使用描述于实施例1的相同分析方法。结果通过荧光光谱和液相色谱法(HPLC)分析种子提取物。
权利要求
,所述液体样品提取自在对种子进行农药处理期间或之后所产生的样品,所述方法包括(a)提供待测试的含水样品和/或有机/含水样品,其中该样品含有提取自种子的杀真菌剂;(b)对样品进行电磁辐射,该电磁辐射的波长足以激发杀真菌剂包含的荧光团;(c)检测样品中荧光团的荧光。
,还包括基于荧光检测定量样品中的杀真菌剂。
,其中所述杀真菌剂是噻菌灵。
,其中激发所述杀真菌剂包含的荧光团的波长是约305nm。
,其中被激发的荧光团所发出的荧光信号的波长是约
360nm。
,其中所述杀真菌剂是噻菌灵。
,其中所述荧光经由荧光光谱仪检测。
,所述方法包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的杀真菌剂施用至种子;并且(b)自种子提取所施用的杀真菌剂;(c)分析所提取杀的真菌剂中的杀真菌剂水平;并且(d)基于在所提取的杀真菌剂中存在的杀真菌剂水平,推演施用至种子的杀真菌剂水平。
,所述方法包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的一种或多种杀真菌剂加至种子;(b)自种子提取至少一种所施用的杀真菌剂;(c)分析所提取的杀真菌剂中所述至少一种杀真菌剂的水平;(d)基于所提取的杀真菌剂中存在的所述至少一种杀真菌剂的水平,推演施用至种子的所述至少一种杀真菌剂的水平;并且(e)基于施用至种子的所述至少一种杀真菌剂的推演水平或者所提取的杀真菌剂中存在的所述至少一种杀真菌剂的水平,将施用至种子的全部杀真菌剂的水平进行关联。
,其中所述至少一种杀真菌剂是噻菌灵。
,所述方法包括(a)在种子处理过程期间,将希望水平的噻菌灵和一种或多种杀真菌剂或杀昆虫剂加至
种子;(b)自种子提取噻菌灵;(c)分析所提取的杀真菌剂中噻菌灵的水平;(d)基于所提取的噻菌灵中存在的噻菌灵的水平,推演施用至种子的噻菌灵水平;并且(e)基于施用至种子的噻菌灵的推演水平或者所提取的噻菌灵中存在的噻菌灵的水平,将施用至种子的杀真菌剂和/或杀昆虫剂的水平进行关联。
,包括(a)容器;(b)提取溶剂;(c)超声仪;(d)荧光光谱仪;以及(e)光源。
全文摘要
本发明涉及检测在种子上存在的杀真菌剂的方法。尤其是,根据本发明的方法可以用来确保种子上存在充足量的杀真菌剂或杀昆虫剂。在具体的实施方式中,所检测的杀真菌剂是噻菌灵。