文档介绍：特罗凯(厄洛替尼)预处理通过多种机制改善非小细胞肺癌异种移植物的光动力治疗
特罗凯(厄洛替尼)预处理通过多种机制改善非小细胞肺癌异种移植物的光动力治疗
皮生长因子受体(EGFR)的异常表达是许多癌症,
包括非小细胞肺癌(NSCLC),头颈鳞状细胞癌和卵巢癌的常见特征。尽管目前EGFR是治疗这些癌症的最受欢迎的分子靶点,但是用小分子抑制剂(即特罗凯(厄洛替尼))或单克隆抗体(即西妥昔单抗)抑制受体并不能作为独立治疗提供长期的治疗效果。有趣的是,我们已经发现,添加特罗凯(厄洛替尼)至光动力治疗(PDT)可以改善典型的特罗凯(厄洛替尼)耐药NSCLC肿瘤异种移植物的治疗反应。在H460人肿瘤异种移植物的PDT之前,特罗凯(厄洛替尼)以三个剂量施用,与单独PDT之后的16%相比,达到了63天的完全缓解率为63%。当将特罗凯(厄洛替尼)加入A549 NCSLC异种移植物的PDT时,发现类似的益处。改善的反应伴随着血管停止增加,特罗凯(厄洛替尼)增加了PDT对内皮细胞的体外细胞毒性。通过体内施用特罗凯(厄洛替尼)来增加光敏剂(苯并卟啉衍生物一酸环A; BPD)的肿瘤摄取; 然而,BPD水平的上升仅部分解释了特罗凯(厄洛替尼)对PDT的益处。因此,用特罗凯(厄洛替尼)进行预处理增加了PDT效应的多种机制,其共同导致治疗功效的大的改善。这些数据表明,在PDT之前,特罗凯(厄洛替尼)的短期给药可以大大提高甚至特罗凯(厄洛替尼)耐药性肿瘤对治疗的反应性。
关键词:特罗凯(厄洛替尼),光动力治疗,非小细胞肺癌,EGFR,VEGF
侵袭性肿瘤的主要特征是表皮生长因子受体(EGFR)的异常表达,EGFR是促进细胞增殖,血管生成和存活的信号蛋白。几个EGFR抑制药物被用于治疗恶性肿瘤,例如非小细胞肺癌(NSCLC),头和颈部鳞状细胞癌(),和乳腺癌(1,2)。这些药物包括EGFR靶向抗体(即西妥昔单抗)和小分子抑制剂(如吉非替尼,特罗凯(厄洛替尼))。EGFR抑制的功效基于肿瘤的分子特征而变化。例如,携带EGFR激活突变的肿瘤往往对EGFR靶向治疗更敏感,而表现KRAS突变的肿瘤反应较差; 而一些肿瘤类型是对EGFR抑制最初敏感,其他人将获得抗性,而使患者有限的治疗选择( 1,3)。因此,虽然EGFR已被广泛用作治疗几种类型的肿瘤的分子靶点,但作为独立治疗的受体的抑制并不能一致地产生临床上的阳性结果。
光动力疗法(PDT)使用光,光敏剂和氧气的组合来造成细胞损伤。与靶向EGFR的药物PDT的组合表明,综合治疗可以增加细胞毒性(4,5)。光敏剂的EGFR靶向降低了PDT后的细胞增殖(6),抗EGFR抗体和小分子抑制剂可以增加
PDT治疗的肿瘤或细胞培养物中的凋亡和/或抑制增殖(7 - 10
)。在卵巢癌,鼻咽癌和膀胱癌肿瘤模型中,PDT与西妥昔单抗联合应用治疗效果(7 - 9)。本研究的目标是双重目标。首先,我们建立了在NSCLC人类肿瘤异种移植物的PDT之前添加EGFR的小分子抑制剂特罗凯(厄洛替尼)的治疗效果。特罗凯(厄洛替尼)是一种口服药物,因此
PDT前给药可以翻译成术中PDT,其中术后重症监护病房的患者口服药物不可行。第二,我们已经阐明了使用这个协议改进响应的机制。已经确定并研究了特罗凯(厄洛替尼)对PDT诱导的肿瘤细胞毒性,内皮细胞损伤和血管功能的影响,对其对长期PDT反应性的贡献。这些研究结果提供了一些洞察,这将为临床开发纳入EGFR与PDT靶向治疗方案提供依据。
细胞系
EGFR野生型KRAS突变体人NSCLC细胞系H460和A549获自American Type Culture Collection(Manassas,VA)。H460-mCherry细胞和SVEC(永生化小鼠内皮细胞)由Drs提供。宾夕法尼亚大学的Jay Dorsey和宾夕法尼亚州费城科学大学的Bin Chen分别。将细胞保持在补充有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的RPMI-1640(H460,SVEC)o's改良的Eagle培养基(A549)中。所有细胞系均使用IDEXX Bioresearch ?(2014年5月)的Cell Check ? Plus认证服务进行鉴定并确认为无支原体。
肿瘤模型
通过在雌性裸鼠(Athymic,Ncr-nu / nu; National Cancer Institute,Frederick,MD)的右肩上皮内注射1×10 6个细胞来繁殖肿瘤。当肿瘤达到6-8毫米的直径时开始研究。调查由宾夕法尼亚大学体育动物护理和使用委员会批准; 动物设施获得AAALAC认证。
太平洋夏令时
动物接受苯卟啉衍生物单酸A(BPD,Visudyne?QLT Ophthalmics,Vanc