文档介绍：该【流式细胞的原理及临床应用课件 】是由【xiang1982071】上传分享，文档一共【38】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【流式细胞的原理及临床应用课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。流式细胞仪原理介绍
流式细胞仪基本原理示意图
流式细胞仪检测什么信号?
细胞
抗原
抗体
荧光
激光束
通过流式细胞仪我们可以得到以下信息 -相对细胞颗粒密度和内部复杂度(SSC) -相对细胞大小(FSC) -染色过细胞的相对荧光强度
流式细胞仪标本准备
染色的一般原则及方法
标本来源:
外周血、骨髓、组织块、培养细胞、脱落细胞及其他。
以及血清或各类体液样本。
抗体染色一般方法
外周血白细胞分析:100ul全血
血小板分析:1~5ul全血(根据样本血小板数量)
红细胞分析:1ul全血(根据样本中红细胞数稀释后使用)
骨髓:100ul
其他样本,计数后决定使用体积
目标细胞数量及检测终浓度:1×106/ml
通过流式细胞仪我们可以得到以下信息 -相对细胞颗粒密度和内部复杂度(SSC) -相对细胞大小(FSC) -染色过细胞的相对荧光强度
CD3+/CD4+:辅助性T细胞
Tc细胞识别抗原活化后释放胞浆内颗粒***:穿孔素perforin和颗粒酶granzyme,杀伤靶细胞。
3、FACSLysingSolution
巨细胞病毒感染
通过淋巴细胞亚群的检测可了解在不同情况下体内免疫功能状态,辅助临床疾病的诊断,探索疾病发病机理、病程、预后,监测、指导临床治疗方案。
NK细胞增高常见于:某些病毒感染性疾病的早期;
强直性脊柱炎是血清阴性脊柱关节病中具有代表性的疾病,临床上曾长期把AS误认为是类风湿性关节炎的一个亚型,60年代以来人们才认识到期无论从病因学、遗传学、流行病学和临床表现特点等诸多方面来看,AS都是一种不同于类风湿性关节炎的独立疾病。
以及血清或各类体液样本。
就目前的研究文献而言,HLA-B27与AS并非绝对相关,有些AS患者表现为HLA-B27阴性,而且并非所有HLA-B27阳性者均出现AS症状。
乙肝(急性期/慢性肝炎)
HLA-B27流式细胞仪检测
CD8+T细胞又称细胞毒性T细胞,Tc或CTL,它在T细胞免疫应答中发挥重要功能。
其中包括:1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE
膜型肾小球肾炎
其中包括:1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE
流式细胞仪分析报告及图谱
以及血清或各类体液样本。
Tc细胞识别抗原活化后释放胞浆内颗粒***:穿孔素perforin和颗粒酶granzyme,杀伤靶细胞。
CD3+/CD4+:辅助性T细胞
孵育、溶血、固定
抗体孵育:室温下避光15分钟(某些情况下如:细胞内因子检测需冰育)
溶血:如样本含中有红细胞需溶血
样本溶血后离心上机检测(固定后可放置较长时间)
流式细胞仪分析报告及图谱
SS(侧向散射光)--反应细胞内物质的多少
FS(前向散射光)--反应细胞大小
设门:选择要分析的细胞群体
设定阴性、阳性范围