用于肿瘤诊断和治疗的组合物和方法.docx

文档介绍：该【用于肿瘤诊断和治疗的组合物和方法 】是由【421989820】上传分享，文档一共【76】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【用于肿瘤诊断和治疗的组合物和方法 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。用于肿瘤诊断和治疗的组合物和方法
专利名称:用于肿瘤诊断和治疗的组合物和方法
技术领域:
本发明致力于可用于诊断和治疗哺乳动物中的肿瘤的物质组合物,及使用那些物质组合物来诊断和治疗哺乳动物中的肿瘤的方法。
背景技术:
恶性肿瘤(癌)是在美国位居心脏病之后的第二位致死原因(Boringetal.,:7(1993))。癌的特征为衍生自正常组织的异常或肿瘤性细胞的数量增加,所述细胞增殖形成肿瘤块;这些赘生性肿瘤细胞侵入邻近组织;及产生恶性细胞,所述恶性细胞最终经血液或淋巴系统传播到局部淋巴结并经称为转移的过程传播到远处。在癌性状态,细胞在正常细胞不生长的条件下增殖。癌自身表现为多种形式,特征为不同程度的侵袭力和进攻性。在寻找癌症诊断和治疗的有效细胞靶物的尝试中,研究人员试图鉴定在一种或多种特定类型的癌细胞的表面上与一种或多种正常非癌性细胞相比特异性表达的跨膜多肽膜相关多肽。通常,此类膜相关多肽在癌细胞的表面上比在非癌性细胞的表面上表达的量更大。此类肿瘤相关细胞表面抗原多肽的鉴定导致了经基于抗体的疗法特异性靶向破坏癌细胞的能力。在这点上,注意到基于抗体的疗法已经证明在某些癌症的治疗中是非常有效
的。例如,HERCEPTIN和RITUXAN(都来自GenentechInc.,SouthSanFrancisco,California)是已经分别成功用于治疗乳腺癌和非何杰金氏(Hodgkin)淋巴瘤的抗体。更具体的说,,其选择性结合人表皮生长因子受体2(HER2)原癌基因的胞外结构域。HER2蛋白过表达在25-30%的原发性乳腺癌中观察到。RITUXAN是遗传工程嵌合鼠/人单克隆抗体,其针对在正常的和恶性的B淋巴细胞的表面上发现的⑶20抗原。这两种抗体都是在CHO细胞中重组生产的。尽管在哺乳动物癌症疗法中有了上述进展,对于能够分别检测哺乳动物中肿瘤的存在和有效抑制肿瘤性细胞生长的另外的诊断和治疗剂仍然存在很大的需要。因此,本发明的目标之一是鉴定在一种或多种类型的癌细胞上与正常细胞上或其它不同癌细胞上相比表达更大量的细胞膜相关多肽,及使用那些多肽及其编码核酸来生成可用于哺乳动物中的癌症的治疗性处理和诊断性检测的物质组合物。
,申请人首次描述了如下所述的细胞多肽(及其编码核酸或其片段)的鉴定,所述细胞多肽在一种或多种类型癌细胞表面上表达的程度高于它们在一种或多种类型正常非癌细胞表面上表达的程度。这些多肽在本文中称为肿瘤相关抗原性靶多肽(Tumor-associatedAntigenicTargetpolyp印tides,“TAT”多肽),它们有望充当哺乳动
物中癌症治疗和诊断的有效靶物。因此,在本发明的一个实施方案中,本发明提供了分离的核酸分子,其具有编码肿瘤相关抗原性靶多肽或其片段(“TAT”多肽)的核苷酸序列。在某些方面,所述分离的核酸分子包含与下述各项具有至少约80%的核酸序列同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的核酸序列同一性的核苷酸序列(a)编码具有本文所公开的氨基酸序列的全长TAT多肽、本文所公开的缺少信号肽的TAT多肽氨基酸序列、本文所公开的有或没有信号肽的跨膜TAT多肽的胞外域、或本文所公开的全长TAT多肽氨基酸序列的任何其它具体定义的片段的DNA分子;或者(b)(a)的DNA分子的互补分子(complement)。在其它方面,所述分离的核酸分子包含与下述各项具有至少约80%的核酸序列同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的核酸序列同一性的核苷酸序列(a)包含本文所公开的全长TAT多肽cDNA的编码序列、本文所公开的缺少信号肽的TAT多肽的编码序列、本文所公开的有或没有信号肽的跨膜TAT多肽的胞外域的编码序列、或本文所公开的全长TAT多肽氨基酸序列的任何其它具体定义的片段的编码序列的DNA分子;或者(b)(a)的DNA分子的互补分子。在其它方面,本发明涉及分离的核酸分子,其包含与下述各项具有至少约
80%的核酸序列同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的核酸序列同一性的核苷酸序列(a)与本文所公开的保藏于ATCC的任何人类蛋白质cDNA的全长编码区编码相同成熟多肽的DNA分子;或者(b)(a)的DNA分子的互补分子。本文的另一个方面提供了分离的核酸分子,其包含如下核苷酸序列,所述核苷酸序列编码跨膜域删除的或跨膜域灭活的TAT多肽,或者与此类编码核苷酸序列互补,其中,本文中公开了此类多肽的跨膜域。因此,设想了本文中所描述的TAT多肽的可溶性胞外域。在其它方面,本发明致力于分离的核酸分子,其与下述各项杂交
(a)编码具有本文所公开的全长氨基酸序列的TAT多肽、本文所公开的缺少信号肽的TAT多肽氨基酸序列、本文所公开的有或没有信号肽的跨膜TAT多肽的胞外域、或本文所公开的全长TAT多肽氨基酸序列的任何其它具体定义的片段的核苷酸序列,或者(b)(a)的核苷酸序列的互补分子。在这点上,本发明的一个实施方案致力于本文所公开的全长TAT多肽编码序列的片段或其互补序列,它们可用作例如杂交探针,所述杂交探针可用作例如诊断探针、PCR引物、反义寡核苷酸探针,或者用于编码全长TAT多肽的片段,可任选编码包含抗TAT多肽抗体、TAT结合寡肽、或其它结合TAT多肽的有机小分子的结合位点的多肽。此类核酸片段
的长度通常为至少约5个核苷酸,或者长度为至少约6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810、820、830、840、850、860、870、880、890、900、910、920、930、940、950、960、970、980、990或1000个核苷酸,其中在此语境中,术语“约,,意指所述核苷酸序列长度加上或减去所述长度的10%。此外,此类核酸片段经常包含衍生自TAT多肽全长编码序列或其互补序列的连续核苷酸。注意到TAT多肽编码核苷酸序列或其互补序列的新片段可以常规方式确定,即使用多种众所周知的序列对比程序中的任一种将TAT多肽编码核苷酸序列与其它已知核苷酸序列对比,并确定哪个(些)TAT多肽编码核苷酸序列或其互补序列是新的。本文设想了TAT多肽编码核苷酸序列或其互补序列的所有此类新片段。还设想了由这些核苷酸分子片段编码的
TAT多肽片段,优选那些包含抗TAT多肽抗体、TAT结合寡肽、或其它结合TAT多肽的有机小分子的结合位点的TAT多肽片段。在另一个实施方案中,本发明提供了分离的TAT多肽,其由上文鉴定的任何分离的核酸序列编码。在某一个方面,本发明涉及分离的TAT多肽,其包含与具有本文所公开的全长氨基酸序列的TAT多肽、本文所公开的缺少信号肽的TAT多肽氨基酸序列、本文所公开的有或没有信号肽的跨膜TAT多肽的胞外域、由本文所公开的任何核酸序列编码的氨基酸序列、本文所公开的全长TAT多肽氨基酸序列的任何其它具体定义的片段具有至少约80%的氨基酸序列同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,100%的氨基酸序列同一性的氨基酸序列。在另一个方面,本发明涉及分离的TAT多肽,其包含与任何本文所公开的保藏于ATCC的人类蛋白质cDNA所编码的氨基酸序列具有至少约80%的氨基酸序列同一性,或者至少约81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性的氨基酸序列。
在又一个方面,本发明涉及分离的TAT多肽,其包含与编码(a)具有本文所公开的全长氨基酸序列的TAT多肽、(b)本文所公开的缺少信号肽的TAT多肽氨基酸序列、(c)本文所公开的有或没有信号肽的跨膜TAT多肽的胞外域、(d)本文所公开的任何核酸序列编码的氨基酸序列、或
(e)本文所公开的全长TAT多肽氨基酸序列的任何其它具体定义的片段的DNA分子的互补序列杂交的核苷酸序列编码的氨基酸序列。在一个具体的方面,本发明提供了分离的TAT多肽,其没有N-末端信号序列和/或没有起始甲硫氨酸,且由编码上文所述氨基酸序列的核苷酸序列所编码。本文还描述了用于产生它的方法,其中所述方法包括在适于表达TAT多肽的条件下培养包含如下载体的宿主细胞,所述载体包含适宜的编码核酸分子,并从细胞培养物回收TAT多肽。本发明的另一个方面提供了分离的TAT多肽,其是跨膜域删除的或跨膜域灭活的。本文还描述了用于产生它的方法,其中所述方法包括在适于表达TAT多肽的条件下培养包含如下载体的宿主细胞,所述载体包含适宜的编码核酸分子,并从细胞培养物回收TAT多肽。在本发明的其它实施方案中,本发明提供了包含编码任何本文所述多肽的DNA的载体。还提供了包含任何此类载体的宿主细胞。举例而言,所述宿主细胞可以是CHO细胞、大肠杆菌()细胞或酵母细胞。还提供了用于产生任何本文所述多肽的方法,包括在适于表达期望多肽的条件下培养宿主细胞并从细胞培养物回收期望多肽。在其它实施方案中,本发明提供了分离的嵌合多肽,其包含与异源(非TAT)多肽融合的任何本文所述TAT多肽。此类嵌合分子的例子包括与异源多肽诸如例如表位标签序列或免疫球蛋白
Fc区融合的任何本文所述TAT多肽。在另一个实施方案中,本发明提供了抗体,其结合,优选特异性结合任何前述或后述多肽。任选的是,所述抗体是单克隆抗体、抗体片段、嵌合抗体、人源化抗体、单链抗体、或竞争性抑制抗TAT多肽抗体与其各自抗原性表位结合的抗体。本发明的抗体可任选偶联生长抑制剂或细胞毒剂诸如***包括例如美登木素生物碱(maytansinoid)或加利车霉素(calicheamicin)、抗生素、放射性同位素、溶核酶(nucleolyticenzyme)或诸如此类。本发明的抗体可任选在CHO细胞或细菌细胞中产生,且优选抑制其所结合的细胞生长或增殖或者诱导其所结合的细胞死亡。为了诊断目的,本发明的抗体可以被可检测地标记,附着于固相支持物,等等。在本发明的其它实施方案中,本发明提供了包含编码任何本文所述抗体的DNA的载体。还提供了包含任何此类载体的宿主细胞。举例而言,所述宿主细胞可以是CHO细胞、大肠杆菌细胞或酵母细胞。还提供了用于产生任何本文所述抗体的方法,包括在适于表达期望抗体的条件下培养宿主细胞并从细胞培养物回收期望的抗体。在另一个实施方案中,本发明提供了寡肽(“TAT结合寡肽”),其结合,优选特异性结合任何前述或后述TAT多肽。任选的是,本发明的TAT结合寡肽可偶联生长抑制剂或细胞毒剂诸如***包括例如美登木素生物碱或加利车霉素、抗生素、放射性同位素、溶核酶或诸如此类。本发明的TAT结合寡肽可任选在
CHO细胞或细菌细胞中产生,且优选抑制其所结合的细胞生长或增殖或者诱导其所结合的细胞死亡。为了诊断目的,本发明的TAT结合寡肽可以被可检测地标记,附着于固相支持物,等等。在本发明的其它实施方案中,本发明提供了包含编码任何本文所述TAT结合寡肽的DNA的载体。还提供了包含任何此类载体的宿主细胞。举例而言,所述宿主细胞可以是CHO细胞、大肠杆菌细胞或酵母细胞。还提供了用于产生任何本文所述TAT结合寡肽的方法,包括在适于表达期望的TAT结合寡肽的条件下培养宿主细胞并从细胞培养物回收期望的TAT结合多肽。在另一个实施方案中,本发明提供了有机小分子(“TAT结合有机分子”),其结合,优选特异性结合任何前述或后述TAT多肽。任选的是,本发明的TAT结合有机分子可偶联生长抑制剂或细胞毒剂诸如***包括例如美登木素生物碱或加利车霉素、抗生素、放射性同位素、溶核酶或诸如此类。本发明的TAT结合有机分子优选抑制其所结合的细胞生长或增殖或者诱导其所结合的细胞死亡。为了诊断目的,本发明的TAT结合有机分子可以被可检测地标记,附着于固相支持物,等等。在又一个实施方案中,本发明涉及物质组合物,其包含与载体组合的如本文所述的TAT多肽、如本文所述的嵌合TAT多肽、如本文所述的抗TAT抗体、如本文所述的TAT结合寡肽、或如本文所述的TAT结合有机分子。任选的是,所述载体是药学可接受的载体。在又一个实施方案中,本发明涉及制品,其包括容器及该容器中容纳的物质组合