文档介绍：植物组织培养中常见问题与对策
1 污染
指在组培过程中培养瓶内滋生菌斑,使培养材料不能正常生长发育,从而导致培养失败的现象。
污染原因(从病原菌分析)
细菌污染:菌斑呈黏粘液状,界限比较明显,一般接种后1~2天即能发现。
主要是大肠杆菌和链球菌。
污染原因(从病原菌分析)
真菌污染:菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显,伴有不同颜色的孢子。接种后3~10天才能发现。
主要是霉菌污染。

外植体带菌培养基及接种器具灭菌不彻底接种操作时带入环境不清洁
污染的预防措施
 防止外植体带菌  选择好外植体采集时期和采集部位  外植体采集以春秋为宜;   优先选择地上部分作为外植体;   阴雨天勿采,晴天下午采集;   采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。
室内或无菌条件下进行预培养。
外植体严格灭菌 
灭菌效果实验 
多次灭菌和交替灭菌
保证培养基及接种器具彻底灭菌
分装时,注射器勿触瓶口。
培养基勿粘瓶口
  检查封口膜是否破损  扎瓶口要位置适当,松紧适宜  保证灭菌时间和高压锅内温度  接种工具用前彻底灭菌  工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌
保证接种与培养环境清洁
 污染瓶经高压灭菌后再清洗接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射,或用臭氧灭菌机消毒定期清洗或更换超净台初过滤器,进行带菌实验;接种前15~20min打开风机,风速调整到20~30m/min,并对台面用75%酒精喷雾消毒定期对培养室消毒,防止高温
2 培养物的不良表现及改进措施
初始培养阶段
继代培养阶段
生根阶段
初始培养阶段
培养物水浸状、变色、坏死、茎断面附近干枯 
可能原因:
表面杀菌剂过量,消毒时间过长,外植体选用不当(部位或时期)。 
改进措施:
调换其他杀菌剂或降低浓度,缩短消毒时间,试用其他部位,生长初期取材。