文档介绍：食品中亚***盐测定(盐酸萘乙二***法)实验
实验4 食品中亚***盐测定(盐酸萘乙二***法)
一、实验原理
制品中加入的亚***盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应,生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白,使肉制品有美
观的颜色。同时亚***盐也是一种防腐剂,可抑制微生物的增殖。由于蛋白质代谢产物中仲***基与亚***反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝***,因此,亚***盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。亚***盐的测定方法主要是重氮偶合比色法,此外可与荧光***偶合,测定其荧光吸收强度,或衍生后用气相色谱法测定。
自样品中抽提分离出亚***盐,亚***盐在酸性条件下,与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐,
此重氮盐再与盐酸2—萘乙二***试剂发生偶合反应,生成紫红色偶氮化合物。其颜色的深度与样品种亚***含量成正比,故可比色测定。
二、试剂和器材
①饱和硼砂溶液:5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中,冷却备用。
②亚铁***化钾溶液:称取106g亚铁***化钾溶于水,并稀释至1000mL。
③乙酸锌溶液:称取220g乙酸锌,加30mL冰醋酸溶于水,并稀释至1000mL。
④果蔬抽提液:溶解50g***化***和50g***化钡于1000mL重蒸水中,用浓盐酸调整到
pH值为1。
⑤氢氧化铝乳液:溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中,滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。用蒸馏水反
复洗涤,真空抽滤,直至洗液分别用***化钡溶液检验不发生浑浊。取下沉淀物,加适量重蒸水使之呈薄糨糊状,捣拌均匀备用。
⑥%对氨基苯磺酸溶液:,溶于100mL20%的盐酸溶液中,闭关保存。⑦%盐酸萘乙二***溶液:***,溶于100mL重蒸水中。
⑧亚***钠标准溶液(5微克每毫升):***铵,以重蒸水定容到500mL。再吸取
此溶液25mL,以重蒸水定容到1000mL,此工作液每毫升含亚***钠5微克。
分光光度计,组织捣碎机。
三、试验步骤
1、样品处理
果蔬类样品用组织捣碎机打浆。称取适量浆液(视式样中***盐含量而定,如青刀豆取10g,桃子、菠
萝取30g),置于500mL容量瓶中。加200mL水,摇匀,再加100mL果蔬抽提液。震荡1h,加
,用重蒸水定容后立即过滤。然后取60mL滤液于100mL容量瓶中,加氢氧化铝液至刻度。用滤纸过滤,滤液应为无色透明。
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2、亚***钠标准曲线的绘制:
用移液管精确吸取亚***, ,