文档介绍：盐酸萘乙二***分光光度法测定肉制品中的亚***盐姓名: 班级:食品科学学号: 一目的要求 1 通过实验强化对紫外—可见分光光度法定量分析原理的理解; 2 了解以紫外—可见分光光度法为基础的检测方法的建立思路; 3 直观了解紫外—可见分光光度计的结构; 4 掌握紫外-可见吸收光谱的测定方法; 5 掌握利用标准曲线法进行定量分析的方法。二实验原理亚***盐在食品生产中用作发色剂和防腐剂,允许用于肉及肉制品的生产加工中,使得肉与肉制品呈现良好的色泽。其呈色机理是,亚***盐与肌肉中的乳酸作用产生亚***,而亚***不稳定易分解产生一氧化氮,然后一氧化氮与肌红蛋白结合产生红色的亚硝基肌红蛋白,使肉制品产生稳定的红色。但是过量的亚***盐能够引起高铁血红蛋白症, 导致组织缺氧,还可使血管扩张、血压降低。在酸性条件下,亚***盐可与对氨基苯磺酸通过重氮化反应定量生成重氮盐,该重氮盐可进一步与盐酸萘乙二***通过偶联反应生成紫红色偶氮染料,在特定波长处产生较强吸收: NH SO H +NO +2H N N SO H +2H O; N N SO H + NHCH CH NH SO H N NHCH CH NH N 通过测定该偶氮染料在特定波长下的吸光度,利用朗伯- 比尔定律( A=KLc )可确定样品中亚***盐的质量浓度。采用标准曲线法进行定量分析时,可对亚***盐标准溶液系列进行上述反应,通过测定该系列的吸光度,利用 excel 回归标准曲线,得到浓度和吸光度的关系,再将样品中亚***盐测得的吸光值带到方程中算出其中亚***盐的浓度。三仪器与试剂 1 仪器 Cary Eclipse 型紫外- 可见分光光度计; BS 124S 电子分析天平。 2 试剂亚铁***化钾[K 4 ) 6· 3H 2 O] 、乙酸锌[Zn(CH 3 COO) 2· 2H 2 O] 、硼砂[Na 2B 4O 7· 10H 2 O] 、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二***,均为分析纯试剂。四实验步骤 1 试剂配制亚铁***化钾溶液: 称取 g 亚铁***化钾, 溶解于水后稀释至 1000m L。乙酸锌溶液: 称取 g 乙酸锌,加 30 mL 冰乙酸溶于水, 稀释至 1000m L。饱和硼砂溶液: 称取 g 硼砂, 溶解于 100 mL 热水中, 冷却后备用。对氨基苯磺酸溶液: 称取 g 对氨基苯磺酸, 溶解于 100 mL 20% 的盐酸中, 置棕色瓶中摇匀, 避光保存,其浓度为 4 g/L 。盐酸萘乙二***溶液: 称取 g 盐酸萘乙二***, 溶解于 100 mL 水中,, 混匀后置棕色瓶中, 避光保存,其浓度为 2 g/L 。亚***钠标准储备溶液: 精密称取 g已于硅胶干燥器中干燥 24 h 的亚***钠, 用蒸馏水溶解移入 500 mL 容量瓶中, 稀释至刻度, 混匀。此溶液亚***钠含量为 200 μ g/m L。亚***钠标准使用液: 临用前吸取亚***钠标准储备溶液 mL 置于 100 mL 容量瓶中, 加水稀释至刻度, 此溶液亚***钠含量为 10 .0μ g/m L。 2 标准溶液系列和样品制备标准溶液系列制备:吸取亚***钠标准使用液 0、、5、 10 、 15 、 20 、 25 mL 于 50 mL 具塞比色管中, 分别加入 2 mL 对氨基苯磺酸溶液,