基因敲除大肠杆菌.pptx

文档介绍：基因敲除提高大肠杆菌工程菌生产异丁醇产量的研究
PART
ONE
论文简介
Abstract
3
01
运用red重组系统敲除大肠杆菌BW25113的pflB,frdAB,fnr和AdhE基因
02
构建pflB,frdAB, BW25113H
03
检测该工程菌在1L发酵罐发酵过程中的生物量,突变菌株的稳定性,异丁醇产量及有机酸含量变化情况
PART
ONE
技术路线
Technology roadmap
5
引物设计
PCR
感受态制备
电转化
异丁醇产量测定
消抗
PART
ONE
结果分析
7
图2:以BW25113为靶基因进行pflbB基因敲除
1,5为验证引物扩增BW25113A
2-4 假阳性扩增
6,7:验证引物扩增BW25113B
BW25113A:pflB基因缺失工程菌,1226kb
BW25113B:氯霉素抗性消除工程菌,253kb
9
图4
图5
BW25113E:fnr基因缺失工程菌,
BW25113F:氯霉素抗性消除工程菌,550kb
1,2:假阳性扩增
3:BW25113E
4-7:BW25113F
BW25113E:fnr基因缺失工程菌,
BW25113F:氯霉素抗性消除工程菌,550kb
1,2:假阳性扩增
3:BW25113E
4-7:BW25113F
BW25113G:adhE基因缺失工程菌,2197kb
BW25113H:卡那抗性消除工程菌,600kb
1:BW25113H
2:BW25113G
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