文档介绍：灭菌法
灭菌法定义
用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。适用于制剂、原料、辅料、医疗器械等的灭菌。
灭菌是指将物品中污染的微生物残存概率下降至一定水平,以无菌保证水平SAL(Sterility Assurance Level)表示。
灭菌程序验证内容
撰写验证方案及制定评估标准。
确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确,并能处于正常运行。
确认关键设备控制仪表在规定的参数范围内能正常运行。
采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验确认灭菌效果符合规定。
完善文件记录,撰写验证报告。
灭菌程序运行监控
关键参数应在验证确定的范围内:温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照剂量等
灭菌程序定期验证,时效不超过半年。
灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
灭菌保证
灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌特性有关,把握微生物污染水平及污染菌耐受性,注意各个环节降低污染程度。
灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。
适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌结果
生物指示剂
基本要求:
菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有可能污染菌的耐受性。
菌种应无致病性。
菌株应稳定,存活期长,易于保存。
易于培养。若使用休眠孢子,孢子含量在90%以上。
常用生物指示剂
湿热灭菌:嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(7953等,活孢子数为5×105~5×106个/片)
干热灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(9372等,活孢子数为5×105~5×106个/片)
辐射灭菌:短小芽孢杆菌孢子(27142等,活孢子数为5×107~5×108个/片)
气体灭菌:
环氧乙烷灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(9372等,活孢子数为5×105~5×106个/片)
气态过氧化氢灭菌:嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(7953等,活孢子数为1×106~5×106个/片)
过滤除菌法:缺陷假单胞菌( 19146等)
湿热灭菌法
在高温高压条件下利用沸水、蒸气变性微生物菌体中的蛋白质、核酸而达到灭菌效果的方法。
效果可靠、操作简便
应用广泛:容器、培养基、无菌衣、胶塞等
包括
热压灭菌
流通蒸汽灭菌
煮沸灭菌
低温间歇灭菌
湿热灭菌条件
121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 × 40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条件。
过度杀灭法
灭菌过程有适当的装载方式,保证灭菌有效均一
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