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水稻ω3脂肪酸脱氢酶的基因克隆和功能探究.pdf

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文档介绍

文档介绍:复旦大学
博士学位论文
水稻ω-3脂肪酸脱氢酶的基因克隆和功能研究
姓名:王敬文
申请学位级别:博士
专业:遗传学
指导教师:沈大棱
20060412
中文摘要关键词:脂肪酸;原位杂交;弧蠡豳水稻;∞一��舅嵬亚饷福蛔;�蜓�克隆到了类黄酮一��,羟化酶的�����<∏�ǎ�蛄泻盼狣����的弧白据的转录信号。为了进一步研究此基因的功能,我们分别正向和反向将反向转化品系。在正向转化品系中,儋,�嫉腛�以正向插入到��埽��启动兰皇后。类黄酮.��一羟化酶���水稻是我国最主要的粮食作物之一,水稻的播种主要分布于热带和亚热带地区,其地理分布主要受温度的影响。不饱和脂肪酸是植物膜系统的重要组份之~,它的含量的变化是植物缓解外界温度压力的一种重要手段。本论文中用�—��的方法从水稻�����锌寺〉奖嗦胨�疽堵烫��一��舅嵬亚饷傅�开放读框,命名为��������咏幌允舅�局械腛����蛑辽儆辛礁�拷贝,或者是由紧密连锁的一个小的基因家族组成。�—��驮�辉咏幌允荆����主要在叶中转录,而在根中几乎检测不到任何��的积累。较低温度下���。����的转录水平较常温���明显增高。原位杂交显示当水稻在�℃下低温处理�旌��旌螅�谝镀�だ缸橹�秃C嘧橹�械哪芗觳獾浇厦飨����的��H胙滩葜校����������两个正向的转化品系,以及�一�子的下游,导致�:�团啵�三烯酸的含量显著增高。低温�娲��天发现,对照烟草����赵刈;�仓�的叶片已经明显受到伤害,并且已经萎缩,而在�一�和���中并没有明显的叶片损伤。在�一�中,三烯脂肪酸的含量较对照相比降低约�.�ィ���高温处理�旌螅�哉罩仓暌丫�菸�劳觯����仍能正常存活。以上数据显示���为编码低温诱导型的叶绿体∞�脂肪酸脱氢酶。苴蝴蝶兰又名蝶兰,原产亚洲热带和澳大利亚,为热带兰中之珍品被益为热带�是合成��’.带羟基的花色素��绱�雀素�墓亟∶福�松�厥抢痘ê妥匣ㄉ�匦纬傻那疤濉1狙芯看雍��蓟ò曛�����疎��疍������腄�克隆是通过基于��囊幌盗蟹椒ɑ竦玫摹�对���进行序列分析表明,该基因的��蛄泻�幸桓瞿诤�瑁�礁鐾庀宰樱�含有一个编码��霭被�岵谢�目7哦量颉�����咏槐砻髟诤��贾兄�存在一个拷贝的��基因。通过�—��姆椒ǚ⑾諴���膍��窃诨ǘ浞�育的中期开始转录,和花青素的积累保持一致;在紫色花瓣中有较高的��的积累,在根中和叶中没有检测到转录。同源模拟��’�疕蛋白的三维结构表���
明此蛋白主要含有两个结构域:�峁褂�含有大量的�菪�腿�鲂〉���叠���峁褂�含有很多�鄣�腿�鰀螺旋�����’�鞍子氲孜�二氢黄酮醇���������慕岷衔坏阃ü�肿佣越拥氖址ń�蟹治霰砻鳎�在此蛋白中存在这一个高度保守的�����氨基酸序列,可能和二氢黄酮醇的芳香环相互作用。关键词:类黄酮.��’一羟化酶,同源摸拟,分子对接,蝴蝶兰,�鯬�
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第一章水稻∞一��舅嵬亚饷傅姆肿由�镅а芯拷���⒅�舅嵬亚饷阜掷嘤肷�镅Чδ�������K�嬖谟谥参镏侍寤�剩�呋�階�结合的脂肪酸形成双键:�脂酰类囊体膜上,催化与甘油脂结合的脂肪酸形成双键。最后一类脱氢酶是膜脂不饱复旦太堂蠖±堂焦途塞丞塑堕:��顾狩惹饷咐才柰跻悸∷芄⋯醢嗳�脂肪酸脱氢酶催化与载体结合的饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸在脂酰链上形成双键。脂肪酸脱氢酶分为脂酰��亚饷���—��������⒅���脱氢酶���狝�������椭�V�亚饷���—����������唷K�在控制生