文档介绍：扬州大学
硕士学位论文
水稻OsOr基因的克隆及其功能研究
姓名:王庆龙
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:储成才;王幼平
20090601
水稻��基因的克隆及其功能研究摘要本研究通过基因工程技术在野生型水稻日本晴中过量表达伪铆基因��������进行实时荧光定量��治觥Q芯勘砻鳎��两个�弁�椿�蚓�W橹�槌尚捅泶铮���晒�菇�宋毖谢�虻墓�泶镌靥錋��::��::��约案扇旁靥錙��海篟���测序表明通过���扩增的傀伽基因的��序列只有两个碱基的差异,不在保守氨��H氲奈毖谢�虻玫焦�勘泶铩Mü�└司�榈嫉淖;�蚍椒ń�刈橹柿WH胍�����云谕�岣咚�局械睦嗪�懿匪睾�浚�钪沾锏礁牧妓�居Q�壑档哪康摹�为此,我们主要开展了以下几方面的研究:���綩���虮泶锬J降难芯浚��以水稻组成型启动子����谝吧�退�救毡厩缰蟹直鸸�勘泶锖透扇臤���颍�源死�首先,为了研究��基因的表达模式,我们利用实时荧光定量��际酰�直鹧∪�野生型水稻的不同组织��ㄋ�境樗肫诘母��ィ�墒煲镀��垡叮�ㄒ约坝�俗橹�提取总量��;竦酶咧柿康腞�后通过反转录获得��基因的��,以此为模板����在水稻各种组织中均有表达,在成熟叶片中表达量最高,其次是嫩叶,在根中表达量最低,不足为叶片中表达量的�ィ籓��在水稻各种组织中也是均有表达,在叶片中表达量最高,在愈伤中表达量最低。其次,我们对水稻两种��蛋白进行了序列比对,并选取���美垂菇����海篛��海簅�表达载体。重组质粒���海篛��海簅�经测序和限制性内切酶酶切验证正确后,通过农杆菌介导的转基因方法转入野生型水稻日本晴,使该基因得到过量表达,并����鞍仔蛄斜榷员砻鳎�街諳��鞍椎陌被�岵谢�哂懈叨韧�葱院拖嗨菩裕�主要差异在��说男藕烹那�颍��叩母叨缺J匦园被�崾峭耆�嗤�摹�基酸位点,没有形成终止子和移码突变;限制性内切酶双酶切结果以及��治鲋っ髦柿�研究��基因的功能。����虻谋泶锪勘萇��基因的表达量高��倍。对转基因水稻进行分子鉴定以及表型分析。主要结论如下:构建正确。���
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