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第��卷第�期�家畜生态����.�����.��
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: 专题论述:�
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��������寡核苷酸探针原位杂交法在�
粪便微生物研究中的应用�
张名涛�,顾宪红�,杨�琳�,梁红杏。�
��.中国农业科学院畜牧研究所,北京������;�.华南农业大学动物�
科技学院,广东广州������;�.温氏集团,广东新兴��������
�摘要��������寡核苷酸探针�以下简称�������探针�原位杂交法,可简单、快速和�
准确地对粪便微生物进行定性和定量测定,本文对该方法及其应用作一综述。�
�关键词�微生物;原位杂交;�������探针�
�中图分类号�����.���文献标识码����文章编号�����—������������—����—���
微生物广泛存在于自然界中,如在空气、水、土�核酸杂交方法近年来发展较快、技术条件比较�
壤、食物以及人和动植物体内均普遍存在。微生物与�成熟。它是根据具有同源序列的两条���单链或�
人和动植物的健康息息相关,有些能致病,有些有����与���单链在适当条件下能互补地形成稳�
益,有些则没有影响,据此可分为有益菌群、中间菌�定的的���双链或���—���或���—����
群和病原菌群。近些年来研究发现人和动物消化道�链,如果用具有特殊标记的����或���片段作�
内附殖着大量微生物,形成动态平衡、复杂的微生物�为探针与微生物的同源����或����杂交,然后�
区系。消化道内微生物区系对宿主的健康和营养物�对含特殊标记的杂交体进行检测,这样就可以对微�
质的消化吸收有着重要作用,有必要通过对粪便中�生物进行定性和定量研究。核酸杂交法主要有�
微生物的定性和定量研究,为消化道内微生物区系��������印迹杂交法、��������印迹杂交法和斑点�
的调控研究提供依据。已有的方法主要有细菌培养�印迹杂交法等,但是它们都有一些缺点如需要提取�
计数法,比较繁琐,结果准确性较差,因此需要建立�微生物核酸,操作复杂等,限制了它们作为一种常规�
快速、方便、准确的定性和定量研究方法。�的微生物定性和定量方法应用于粪便中微生物的研�
随着现代分子生物学的发展,对微生物核酸序�究。而新建立起来的一种核酸杂交法——��������
列分析的分子生物学方法亦得到迅速发展。它通过�探针原位杂交法,方便、快速且准确,已成为粪便微�
对微生物的核酸序列片段分析,从基因水平对微生�生物定性和定量研究的有效方法�������。�
物进行定性和定量研究,因此也称为基因型法。它可��������原位杂交法是指用�������探针�
以解决表型法中存在的一些问题,如不用培养微生�与微生物中同源核苷酸序列杂交,通过检测带有标�
物、可研究微生物的系统发育关系等。基因型法种类�记物的杂交产物,可以检测出待测样品中微生物种�
很多,如�����含量测定、���、���序列分析、�类和数量,特异性和灵敏性都很高。�������探针�
���一变性梯度凝胶电泳����—����或���