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免疫组织化学技术2.ppt

文档介绍

文档介绍:免疫病理学技术在科研及临床中的运用
1
免疫病理学
一、免疫细胞化学
二、免疫组织化学
三、免疫荧光组织化学
2
一、免疫细胞化学
1、定义:利用已知抗体检测细胞爬片上细胞是否存在相应的抗原。
2、原理:抗体+细胞抗原----显色
3、运用:检测相关基因的表达
3
4
二、免疫组织化学 Immunohistochemistry, IHC
原理
用途
试剂配置
操作步骤
5
免疫组织化学技术定义和原理
免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术是指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织呈色反应,借助可见的标记物,对相应的抗原或抗体进行定位、定性和定量检测的一种方法。
“IHC makes it possible to visualize the distribution and localization of specific ponents within cells and in the proper tissue context. ”
6
+
标记抗体
标记的抗原抗体复合物
免疫组织化学反应原理
组织抗原
1 荧光素
2 酶标
3 金属离子
4 同位素
HPR-DAB显色呈棕黄色
7
间接法:灵敏性
三步法、两步法
直接法:特异性
一步法
两种免疫组织化学反应方法
8
亲和素-生物素方法(三步法):ABC、SP法
多聚螯合物酶法(两步法):Supervision法
9
用途
临床病理诊断:肿瘤分类诊断
上皮来源:CK,EMA
间叶来源:Vimentin
淋巴组织: LCA
科研:组织抗原表达情况
10