文档介绍：高中生物基因工程考点知识点汇总
基因工程考点知识点汇总
一．基因工程的概念
1. 概念
操作环境操作对象操作水平基本过程结果
生物体外基因分子水平剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因高中生物基因工程考点知识点汇总
基因工程考点知识点汇总
一．基因工程的概念
1. 概念
操作环境操作对象操作水平基本过程结果
生物体外基因分子水平剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因产物
由于基因工程是在DNA分子水平上进行操作,因此又叫做重组DNA技术。

二．基因工程的基本工具
（一）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（简称限制酶）
1．来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
2．功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两
个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
3．结果：经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
（二）“分子针线”——DNA连接酶
1．分类：根据酶的来源不同，可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类
2．功能：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
★两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键
②区别：E．coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使黏性末端之间连接；
T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。
★DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较
DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA 双链单链
模板不要模板要模板
连接的对象2个DN***段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DN***段上相同点作用实质形成磷酸二酯键
化学本质蛋白质
(三) “分子运输车”——载体
：①能在受体细胞中复制并稳定保存；②具有一至多个限制酶切割位点，供外源DN***段插入；③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
：质粒、噬菌体和动、植物病毒等。
最早应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的双链环状DNA分子。
三．基因工程的基本过程
(一) 获得目的基因（目的基因的获取）
：①从自然界中已有的物种中分离出来，如可从基因文库中获取。
②用人工的方法合成。
★获得原核细胞的目的基因可采取直接分离，获取真核细胞的目的基因一般是人工合成。
★人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

（1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。
（2）目的：获取大量的目的基因（3）原理：DNA双链复制
（4）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链；第二步：冷却