文档介绍：第二章植物组织培养实验室的构建与操作技术
主要内容
组织培养实验仪器设备及使用方法
培养基的制备方法和步骤
外植体的灭菌方法
无菌操作技术
褐变和玻璃化原因及应对措施
实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。
实验室的大小应取决于工作的目的和规模
按组织培养流程来设计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱
利用一定的设备、器材和特殊的实验室结构设计,达到严格无菌的条件
第一节植物组织培养实验室及主要设备
一、实验室设计与设备
组培的常见技术路线:
外植体→愈伤组织→不定芽→生根→再生植株
基本的工艺流程:
容器具洗涤,物质准备→配置培养基并灭菌→外植体消毒与无菌操作接种→观察、记录、处理(脱分化、再分化、继代) →再生植株
标准的组培实验室
洗涤室、准备室、无菌室、培养室、观察室等
基本组培实验室
准备室(含配药室)、缓冲间、无菌操作室、培养室
功能:进行一切与实验有关的准备工作
器皿洗涤、药品的配制
培养基配制与分装
培养基和培养器皿的灭菌
培养材料的预处理等
要求:
明亮、通风
便于多人同时工作
地面应便于清洁,并应进行防滑处理
1、准备室(化学实验室)
准备室主要仪器设备:
工作台
药品柜
冰箱
普通冰箱、低温冰箱等。主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。
天平
、(用于称量微量元素和一些较高精确度的实验用品)、(用于称取用量较大的糖和琼脂等)
放置在水平、干燥、不受震动的操作台上
(5)恒温水浴锅
(6)蒸馏水发生器
蒸馏水用于配制母液或培养基(普通实验可以用自来水代替蒸馏水)
(7)电炉
(8)高压灭菌锅
进行培养基、水和器械用具的灭菌