文档介绍：反相高效液相色谱法测定清淋冲剂中大黄素和大黄酚的含量
【关键词】 反相
摘要:目的建立清淋冲剂中大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱(求RPHPLC)法,检测波长:254n历m。结果大黄素线性范围~μg(r=8俳),大黄酚线性范围~μg(r=9),糟平均回收率大黄素%,RSD=%;大黄蜾酚%,RSD=%。结论该方法简便、准挞确、重现性好,可作为质量检验的一个定汊量方法。
关键词:反相高效液相色谱法桷;清淋冲剂;大黄素;
清淋冲剂为临床橥常用中成药,收载于《卫生部药品标准》︻中药成方制剂第六册,具有清热泻火,利哲水通淋的功效。标准中未收载该制剂的含缧量测定,本实验采用HPLC法同时测定馆了该制剂中两种蒽醌类成分大黄素、大黄袱酚的含量,为完善清淋冲剂的质量标准提囤供了依据。
1仪器与材料
SSIPC呱2000高效液相色谱仪,SSIMod婉el500紫外检测器,ANASTAR坼色谱工作站。大黄素、大黄酚对照品(中さ国药品生物制品检定所):清淋冲剂(某父药厂,3个不同批号);甲醇为色谱纯,眉水为重蒸去离子水,其余试剂为分析纯。
2方法与结果
色谱条件色谱柱:LichrospherC18(mm×200湃mm,5μm),流动相:甲醇%磷酸(苜85∶15),检测波长254nm,柱顺温:30℃,流速ml/min。
对照槟品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄深酚对照品适量,加无水乙醇醋酸乙酯(2⑻∶1)制成每1ml含大黄素mg,大黄营酚mg的混合溶液,即得。
供试品溶液楝的制备取清淋冲剂2g,精密称定,加乙现醇25ml,超声处理20min 用乙腌醇补足损失的重量,滤过,精密量取续滤液10ml,置烧瓶中,水浴蒸干,加3醪0%乙醇盐酸(10∶1)溶液15m1玳,置水浴中加热水解1h,立即冷却,用辟氯仿强烈振摇提取4次,15ml/次,俘合并氯仿液,置水浴上蒸干,残渣用无水┣乙醇醋酸乙酯(2∶1)溶解,移置25ぞml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微湄孔滤膜(μm)滤过,即得。
阴性对照谶液的制备按处方比例及生产制备方法,自竞制不含大黄药材的阴性样品,然后按供试惨品溶液的制备方法,制备阴性空白对照溶液。
空白干扰实验分别吸取供试品溶液芮、阴性空白对照溶液、对照品溶液,按上蛏述色谱条件分别进样测定,结果阴性空白
袤对照溶液在大黄素峰、大黄酚峰相应的保伎留时间无干扰。
线性关系考察精密称取大黄素、大黄酚对照品混合溶液分别进样,,,,μl在上述色谱条件下进行检测瘿,测定大黄素、大黄酚峰面积,以峰面积岜积分值Y为纵坐标,对照品进样量X为横蜜坐标,经线性回归分析,得大黄素的回归黻方程为:Y=3238,r=8;大黄酚冰的回归方程为:Y=4375350X-哞423,r=9。结果表明:大黄素进样跺量在~μg,大黄酚进样量在~μg范围螟内,呈良好的线性关系。
精密度实验精莎密吸取对照品溶液μl,在上述色谱条件寸下,连续进样5次,结果峰面积大黄素R拒SD=%,大黄酚RSD=%。