文档介绍：1 反相高效液相色谱法测定清淋冲剂中大黄素和大黄酚的含量【关键词】反相摘要:目的建立清淋冲剂中大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱(RPHPLC) 法, 检测波长: 254 nm 。结果大黄素线性范围 ~ μ g(r= 8), 大黄酚线性范围 ~ μ g(r= 9), 平均回收率大黄素 %, RSD= %; 大黄酚 %, RSD= %。结论该方法简便、准确、重现性好, 可作为质量检验的一个定量方法。关键词:反相高效液相色谱法;清淋冲剂;大黄素; 清淋冲剂为临床常用中成药,收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第六册, 具有清热泻火, 利水通淋的功效。标准中未收载该制剂的含量测定, 本实验采用 HPLC 法同时测定了该制剂中两种蒽醌类成分大黄素、大黄酚的含量,为完善清淋冲剂的质量标准提供了依据。 2 1 仪器与材料 SSI PC2000 高效液相色谱仪, SSI Model 500 紫外检测器, ANASTAR 色谱工作站。大黄素、大黄酚对照品( 中国药品生物制品检定所) :清淋冲剂( 某药厂, 3 个不同批号) ;甲醇为色谱纯,水为重蒸去离子水,其余试剂为分析纯。 2 方法与结果 色谱条件色谱柱: Lichrospher C18( mm × 200 mm ,5μ m) , 流动相: 甲醇 %磷酸(85 ∶ 15) , 检测波长 254 nm ,柱温: 30℃,流速 ml/min 。 对照品溶液的制备分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量, 加无水乙醇醋酸乙酯(2∶ 1) 制成每 1 ml 含大黄素 mg ,大黄酚 mg 的混合溶液,即得。 供试品溶液的制备取清淋冲剂 2g ,精密称定,加乙醇 25 ml, 超声处理 20 min 用乙醇补足损失的重量, 滤过, 精密量取续滤液 10 ml ,置烧瓶中,水浴蒸干,加 30 %乙醇盐酸(10 ∶ 1) 溶液 15 m1 ,置水浴中加热水解 1 h, 立即冷却, 用氯仿强烈振摇提取 4 次, 15 ml/ 次,合并氯仿液,置水浴 3 上蒸干,残渣用无水乙醇醋酸乙酯(2∶ 1) 溶解,移置 25ml 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜( μ m) 滤过, 即得。 阴性对照液的制备按处方比例及生产制备方法,自制不含大黄药材的阴性样品,然后按供试品溶液的制备方法,制备阴性空白对照溶液。 空白干扰实验分别吸取供试品溶液、阴性空白对照溶液、对照品溶液, 按上述色谱条件分别进样测定, 结果阴性空白对照溶液在大黄素峰、大黄酚峰相应的保留时间无干扰。 线性关系考察精密称取大黄素、大黄酚对照品混合溶液分别进样 , , , , μl 在上述色谱条件下进行检测, 测定大黄素、大黄酚峰面积, 以峰面积积分值 Y 为纵坐标, 对照品进样量 X 为横坐标, 经线性回归分析, 得大黄素的回归方程为: Y=3 238 -71 , r= 8; 大黄酚的回归方程为: Y=4 375 350X-423 , r= 9。结果表明: 大黄素