文档介绍：JASCO J-1500圆二色谱仪操作培训
----食品科技学院中心实验室唐老师
目录
1、圆二色谱仪基本原理与应用
2、 JASCO J-1500 基本组成与附件
3、开机与基本操作规程
4、数据分析
5、关机与试验注意事项
1、圆二色谱仪基本原理
平面偏振光的电向量E
起偏振器
自然光的电向量E
椭圆偏振光:两束偏振光的振幅(强度) 不相同
圆二色性(CD):活性物质对左、右旋圆偏振光的吸收率差值,将传播的左右圆偏振光变成椭圆偏振光。
两束互相垂直,振幅相等的平面偏振光,其位相相差1/4波长时,合成圆偏振光。
圆二色性(CD)的表示:
CD单位转换方法:g/post/circular-dichroism-units-
Ellipticity(椭圆率θ):mdeg,定义单位,仪器测定直接显示CD图y坐标。
Mean residue ellipticity or Molar ellipticity (摩尔椭圆率[θ]):-1,文献中通常都使用
根据Beer-Lambert law 有:θ= [θ]. 或[θ]=mdeg/( ) (c-摩尔浓度)
-1
对于蛋白质,使用的是mean residue ellipticity。由于mean residue molecular weight= protein formula weight/number of residues.
摩尔圆二色性为摩尔消光系数的差值(delta epsilon),即:Δε= εLCP- εRCP在分子模拟中通过高斯理论计算CD光谱时,得到的结果通常是以摩尔圆二色性Δε表示。Δε与摩尔椭圆率(molar ellipticity)[θ]之间的转换:[θ]= Δε
圆二色谱仪应用:
蛋白质折叠研究
蛋白质构象研究
DNA/RNA相互作用
酶动力学研究
有机立体化学研究
光化学物质纯度检测
药物量的分析
天然有机化学
生化和大分子
金属复合物化学
医学
农业化学
物理化学
快速扫描实验
通过CD光谱可用于分析诸如核酸、蛋白质、多糖等生物大分子光活性物质的空间结构。
蛋白质:
氨基酸的圆二色性: 在可见光区没有吸收,紫外区只有芳香族色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。
2、 JASCO J-1500 基本组成与附件
配置:
1)检测器: UV-VIS 163-950nm
NIR 400-1250nm
2) 光源:氙灯
3)气体:高纯N2
4)多通道测定(CD/HT/Abs…),
CD测定范围:±20, 200, 2000,10000 mdeg
5) 蛋白质二级结构分析软件
6)其他附件:变温支架、停流附件等