文档介绍：3
河南农业科学
兰州百合脱毒技术研究
刘芬,王发林
(甘肃省农业科学院林果花卉研究所,甘肃兰州 730070)
摘要: 以兰州百合为试材,通过茎尖、鳞片、种子、花丝等外植体培养,花丝培养结合热处理,对百合
进行脱毒研究,结果表明, 花丝较理想的诱导培养基为 MS + 6 - BA 1. 0 mg/ L + IBA 0. 5 mg/ L 。
花丝诱导出不定芽后, (37 ± 2) ℃热处理 28 d ,切取(0. 9 ± 0. 1) mm 茎尖培养, 黄瓜花叶病毒
(CMV) 、百合无症状病毒(L SV) 的一次性脱毒率均达 80 %以上,效果较好。
关键词: 兰州百合; 脱毒; 组培; 热处理; 外植体
中图分类号: S644. 1 文献标识码: A 文章编号: 1004 - 3268 (2007) 07 - 0093 - 03
兰州百合( L ili um davi dii unicolor Cotton) 是等不同浓度激素的培养基上培养。
食用百合中的优良品种,在国内外享有盛名。但在 1. 1. 2 茎尖培养田间选择约 8. 0 cm 高的外观正
生产中由于长期采用无性繁殖扩大再生产,以及昆常植株,剪取 2. 0 cm 茎尖茎段,洗衣粉水浸泡 5 min
虫传播等因素,使得植株病毒感染很普遍。王发林后,用自来水冲洗 1 h 后,70 %酒精浸泡 30 s ,再用
[1 ]
等通过病毒检测研究,确定了危害兰州百合的病 0. 1 %的 HgCl2 溶液 12 min 灭菌处理,最后无菌水
毒主要有黄瓜花叶病毒(CMV) 和百合无症状病毒冲洗 6 次, 解剖镜下切取不同大小茎尖( 1. 0 ~
(L SV) ,感染率达 100 % ,且为 2 种病毒复合侵染。 1. 5 mm , 0. 8 ~ 1. 0 mm , 0. 5 ~ 0. 8 mm 、0. 3 ~
病毒感染后表现不同程度的株体矮小、叶色浅黄症 0. 5 mm , < 0. 3 mm) ,分别接种于培养基 A1 (MS + 6
状,造成品质下降、减产,严重影响着其经济价值。- BA 0. 05 mg/ L + NAA 0. 05 mg/ L) 上培养。
如何脱除兰州百合主要病毒,恢复其种性,提高产量 1. 1. 3 鳞片培养选择新鲜、无病斑的鳞茎,除去
和品质,成为生产中亟待解决的问题。须根,剥取中层近基端鳞片,用洗衣粉溶液充分洗
对百合脱毒的研究国内外均有报道[2~6 ] ,但有涤,再用清水冲洗干净,将冲洗净的鳞片用 75 %的
关兰州百合脱毒技术研究及应用至今未见报道。本酒精浸泡 1 min ,然后用 0. 2 %的 HgCl2 溶液 14 min
试验通过种子、茎尖、鳞片、花丝等外植体培养,花丝灭菌处理,最后用无菌水冲冼 5 次后,将鳞片切成
培养结合热处理,首次对兰州百合进行脱毒研究,以 5 mm × 5 mm 的小块,内面朝上接种于 MS + 6 - BA
期找到一种适宜的脱毒途径和方法应用于生产。 0. 5 mg/ L + NAA 0. 5 mg/ L 培养基上,每 150 mL 三
角瓶接种 8~15 片。
1 材料和方法
1. 1. 4 种子培养挑选饱满种子加入洗涤剂浸泡,
1. 1 外