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14 卷 1 期生物工程学报 Vol. 14 No. 1
1998 年 1 月 Chinese Journal of Biotechnology January 1998
裸燕麦胚性愈伤组织培养及悬浮系的建立
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崔林范银燕
(山西省农科院高寒作物研究所大同 037004)
摘要裸燕麦成熟胚在 IN6 培养基上诱导培养,初始愈伤组织为白色、瘤状、外软内硬、易
分化植株的非松脆类型。当在 IM1~IM4 培养基上进行循环式调控培养,经 7~8 个月,初始
愈伤组织转变为浅黄色、小颗粒状、生活力强的松脆型胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织置于
液体培养基中悬浮培养,得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养获得了再
生植株,移栽成活率达 95 %以上。
关键词裸燕麦,成熟胚,胚性愈伤组织,悬浮培养,再生植株
学科分类号 Q78
在组织和细胞培养过程中会出现多种愈伤组织类型。由于不同类型愈伤组织的活力
差异较大,直接影响着细胞悬浮培养的效果,也影响着植株再生能力的强弱。王海波曾提
出关于组织培养中细胞状态值的调控方程[1 ] ,随后在小麦上形成了愈伤组织状态调控的
技术体系[2 ] 。本文就裸燕麦近年来在愈伤组织状态调控以及悬浮细胞系培养的研究结
果报道如下。
1 材料与方法
1 1 培养材料的处理
用裸燕麦( A uena nuda L . ) :晋燕 8 号、8343 、8330 、品 6 号、品 16 号、20 - 1 的饱满、
具有发芽能力的成熟种子,采取两步消毒法,即取胚前消毒;70 %乙醇浸泡 2min 后无菌水
冲洗 1 次,安替福民原液浸泡 2h ,无菌水冲洗 3 次,无菌水浸泡 14~16h 。剥取种胚后第
2 次消毒:安替福民原液浸泡 30min ,无菌水冲洗 5 次。接种在 IN6 培养基上(N6 附加
3mg/ L 2 ,4 D ,1mg/ L NAA ,0. 5mg/ L KT) ,在人工气候箱中暗培养,温度 26~28 ℃。
1 2 愈伤组织培养
成熟胚诱导的初始愈伤组织在改进的 IM1~IM4 4 种配方的培养基上继代培养,每隔
25~30d 继代一次。按照 IM2 、IM3 、IM4 、IM1 的顺序,每种培养基继代 4 次后,转移到下
一种培养基上培养。根据松脆性和形态愈伤组织分为:松脆型(浅黄色、颗粒< 2mm、结
构松散、生长快,易产生胚状体) 、非松脆型(白色、瘤状、外软内硬或致密,不易分散、生长
较快,易分化幼芽) 、中间型(其它各类愈伤组织) 。每次继代前统计 3 种类型的愈伤组织
百分率,然后挑选松脆型愈伤组织,2/ 4 继续培养、1/ 4 转移到分化培养基上诱导再生植
山西省自然科学基金资助项目。
收稿日期:1996 10 07 ,修回日期:1997 07 07 。
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