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胃蛋白酶效价测定实验方案.doc

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胃蛋白酶效价测定实验方案.doc

上传人:buhouhui915 2018/3/3 文件大小:36 KB

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胃蛋白酶效价测定实验方案.doc

文档介绍

文档介绍:胃蛋白酶
检验用试剂: 盐酸、酪氨酸、胃蛋白酶、三***醋酸、牛血红蛋白
酪氨酸烘干至恒重(105℃)、试管(16支/组,至少12支/组,最少8支试管)
试液的配制:
1mol/L盐酸溶液:90ml盐酸,加水稀释并定容至1000ml。(配500ml)
盐酸溶液:取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至1000ml。(每组各配1000ml)
5%三***醋酸溶液:配600ml
血红蛋白试液:配600ml (每组至少20ml)
血红蛋白试验取牛血红蛋白1g,加盐酸溶液(取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至1000ml)使溶解成100ml,即得。本液置冰箱中保存,2日内使用。
对照品
供试品
供试品的空白对照
对照品的空白对照
试管编号
1、2、3
4、5、6
7
8
对照品溶液

供试品溶液

水浴保温
37℃±℃水浴中,保温5 分钟
预热的血红蛋白试液
加入预热至37℃±℃的血红蛋白试液5ml ,摇匀,在37℃±℃水浴中反应10分钟
加入5%三***醋酸溶液5ml摇匀
供试品溶液1ml
盐酸溶液1ml
摇匀,滤过,取续滤液备用
275nm 的波长处测定吸收度
本品系自猪、羊或牛的胃黏膜中提取的胃蛋白酶。每1g中含蛋白酶活力不得少于3800单位。
【效价测定】对照品溶液的制备精密称取经 105℃干燥至恒重的酪氨酸适量,加盐酸溶液〔取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至1000ml 〕制成每1ml 的溶液。
供试品溶液的制备取本品适量,精密称定,用上述盐酸溶液制成每1ml 中约含 ~。
测定法取试管6 支,其中3 支各精密加入对照品溶液1ml ,另3 支各精密加入供试品溶液1ml ,置37℃±℃水浴中,保温5 分钟,精密加入预热至37℃±℃的血红蛋白试液5ml ,摇匀,并准确计时,在37℃±℃水浴中反应10分钟。立即精密加入5%三***醋酸溶液5ml ,摇匀,