DNA的定量测定.doc

文档介绍：DNA的定量测定-二苯***法
一、原理
DNA分子中的脱氧核糖基,在酸性溶液中变成-羟基-a-***基戊糖,与二苯***试剂作用生成蓝色化合物,在一定波长范围内,化合物蓝色的深浅与DNA的含量成比例关系,可用比色法测定
二、实验仪器
试管
移液管
7220分光光度计
三、实验试剂
1、DNA标准液(200ug/ml):称取10mgDNA钠盐溶于5mol/l氢氧化钠溶液并稀释至100ml。
2、二苯***试剂:
A液:称取纯二苯***,溶于100ml冰乙酸,。贮于棕色瓶中。
B液:,临用时配制
临用时,
四、试验步骤

取干燥的试管6支,编号,按下表加入试剂:
0
1
2
3
4
5
DNA标准液
0





蒸馏水





0
二苯***试剂






加毕,混匀,在60度水浴中保温45分钟,冷却后,在595nm波长下测吸光度,以吸光度对DNA浓度作标准曲线。

吸取DNA样液2ml,加入二苯***, 加毕,混匀,在60度水浴中保温45分钟,冷却后,在595nm波长下测吸光度,根据所测得的吸光度对照标准曲线求得DNA的质量。
五实验结果及处理