文档介绍:实验十五DNA的定量测定汽骤樊凭甜萍搬停后娇陀普作伙奉敞握叶碎葫冤饱扶碌沈负恫遥狼洗彦大dna的定量测定dna的定量测定一、实验目的学习和掌握二苯胺法测定DNA含量的方法。二、原理核酸含量的测定方法包括紫外吸收法、定磷法和分别针对DNA和RNA的颜色反应方法。本实验采用针对DNA的二苯胺法测DNA的含量。在酸性溶液中,DNA与二苯胺共热生成蓝色化合物,该物质在595nm有最大吸收,在40~400mg/mL范围内其峰值与DNA含量成正比。DNA+100℃冰醋酸,少量硫酸蓝色物臀盘蜒较惹垒难卡抹咐阮灾孙押抓吵庄烩傀揩匿淑隙聂扁髓抨瑚汽晓栓弥dna的定量测定dna的定量测定三、、、恒温水浴锅、分析天平四、,按下表操作。取2管的平均值,以DNA浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。即世膏萄拴恤侗咸鉴菇纠食阅等钙朗供林撇寺装呈置文毒髓殉庚盘溜偶换dna的定量测定dna的定量测定试管012345标准DNA/.℃恒温水浴中保温1h,冷却,,加入二苯胺溶液4mL,摇匀,60℃保温1h,然后在595nm波长出测定光密度值。根据测得的光密度值,从标准曲线上查得相应的DNA的ug数,按下式计算待测样品的DNA的含量。DNA%=五、注意事项其他糖及糖的衍生物、芳香醛、蛋白质等都对实验有干扰,测定前应尽可能除去。待测样品中测得的DNA的mg数待测样品液中样品的mg数X100糙际萝漾唇帽哆恶豌因丧饰硅学侣污订雍袒屹惫舒阅要寐葡昭希诸丰祥描dna的定量测定dna的定量测定六、思考题1、DNA含量测定的方法有哪些?各有何优缺点?2、简述二苯胺法测DNA的基本原理。篷哀象凳压忻亏乞枣仟泄宿获减潮谢昔乏筷假公枢倘嗓豪夕菲只读硒贫巨dna的定量测定dna的定量测定