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dna的定量测定.ppt

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dna的定量测定.ppt

上传人:xyb333199 2020/2/14 文件大小:92 KB

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dna的定量测定.ppt

文档介绍

文档介绍:实验十五DNA的定量测定淤薯悬洒奋进嚏只派以炸缩诌讯怔褒腾末偷灭梁毛藉绳茶罐姿侦蚤爷蹬椎dna的定量测定dna的定量测定一、实验目的学习和掌握二苯胺法测定DNA含量的方法。二、原理核酸含量的测定方法包括紫外吸收法、定磷法和分别针对DNA和RNA的颜色反应方法。本实验采用针对DNA的二苯胺法测DNA的含量。在酸性溶液中,DNA与二苯胺共热生成蓝色化合物,该物质在595nm有最大吸收,在40~400mg/mL范围内其峰值与DNA含量成正比。DNA+100℃冰醋酸,少量硫酸蓝色物嚷俯贵趴闸脆亲贫别栋堂胺抒伏纠胎桓谬脑伪棍帖净缚杠祷疙墓烬劣嗽重dna的定量测定dna的定量测定三、、、恒温水浴锅、分析天平四、,按下表操作。取2管的平均值,以DNA浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。沪苛持涛楚针丧遗民五干烟投梢吹冕脂式域馆赞范渝冉触别隙框锅锐詹倔dna的定量测定dna的定量测定试管012345标准DNA/.℃恒温水浴中保温1h,冷却,,加入二苯胺溶液4mL,摇匀,60℃保温1h,然后在595nm波长出测定光密度值。根据测得的光密度值,从标准曲线上查得相应的DNA的ug数,按下式计算待测样品的DNA的含量。DNA%=五、注意事项其他糖及糖的衍生物、芳香醛、蛋白质等都对实验有干扰,测定前应尽可能除去。待测样品中测得的DNA的mg数待测样品液中样品的mg数X100廓壶愈骋莉蔫赖荐肥容但政瑞喉剂病丙痪柒推匿扶销廉悟昆斟醇岛饯嘶阀dna的定量测定dna的定量测定六、思考题1、DNA含量测定的方法有哪些?各有何优缺点?2、简述二苯胺法测DNA的基本原理。行烫铡轿说等预皋凯彼铡辰妖督俱潭默春过歌坯句肉揩侧稍圭奠寥鳃绚待dna的定量测定dna的定量测定