文档介绍：高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量论文
李越峰,杨武亮,沈菲,严兴科,李廷利
【摘要】目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同白芍药材中芍药苷含量,确定哪种白芍含芍药苷最高。方法采用色谱柱:Hypersil C18柱( mm×200 mm,5μm);流动相:乙腈-%磷酸水(14:86);检测:UV 230 nm;流速: ml/min;柱温:25℃。结果2年生、10月份采收贮存期短的亳州白芍芍药苷含量最高。结论该方法简便准确可靠、重复性好。
【关键词】白芍芍药苷高效液相色谱质量
Abstract:ObjectiveTo pare the quality of different Radix Raeoniae Alba ethods. MethodsThe separation n( mm×200 mm,5μm); the mobile phase ml/min; the column temperature e harvested in October method is simple,.freelg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备
g,置50 ml容量瓶中,精密加入50%乙醇35 ml,超声提取30 min,冷却,加50%乙醇至刻度,摇匀,滤过, μm滤膜,取续滤液作为供试品溶液。
色谱条件
色谱柱: Hypersil C18柱( mm×200 mm,5 μm)(大连Elite公司);流动相:乙腈-%磷酸水(14∶86);检测:UV 230 nm;流速: ml/min;柱温:25℃。理论塔板数以芍药苷峰计算不得低于2 000。在上述色谱条件下,取对照品溶液、供试品溶液各进样10 μl进行HPLC测定,结果见图1~2。由图中可见供试品中芍药苷与芍药苷对照品峰保留时间一致,并且与样品中其它组分达到了很好的分离。
线性关系
80 g,置50 ml容量瓶中,加稀乙醇稀释至刻度, mg/ml的芍药苷对照品溶液,,,,, ml的对照品溶液,分别置6个25 ml的容量瓶中,用稀乙醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液。分别精密吸取上述对照品溶液各10 μl,绘制标准曲线,得回归方程Y=1 4X+ 5,r= 99。
提取方法的确定
本实验对提取溶剂、提取溶剂的浓度、提取时间、提取方法等进行综合考察,最后确定供试品溶液的制备方法为:用50%乙醇超声提取30 min即可。
精密度实验
精密吸取同一份供试品溶液10 μl,重复进样6次,测定芍药苷峰面积积分值,%。
重现性实验
按“供试品溶液的制备”方法,对同一批样品分别制备6份供试品溶液,各吸取10 μl进样测定,%。
稳定性实验
取同一份供试品溶液在上述色谱条件下,分别在0,6,12,24,36,72 h各进样10 μl,%。
回收率实验