文档介绍：利用PCR技术扩增目的基因
有些老师不理解“利用PCR技术扩增目的基因”为什么也是
获取目的基因的一种方法。
其实从PCR技术过程中,你能看到是可以得到目的基因的,
经过三轮复制后,就可以得到目的基因。随后,可以把目
的基因大量扩增。
下面,看动画和一个例题。希望给你一点帮助。
利用PCR技术扩增目的基因
变性
退火
延伸
三
步
曲
例.“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR
技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物
(注:引物作用是与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下
就可以继续链的延伸),两种引物及其与模板链的结合位置
如下图甲所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,
如下图乙所示,其中第⑤种DNA分子有几个( )
提示:⑤就是目的基因
变性:加热至90~95 ℃(解旋)
引物1
引物2
X基因
3’
3’
5’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
退火:冷却至55~60℃(引物结合)
延伸:加热至70~75℃(互补链合成)
第一轮复制得到2个分子,即①②各一个
①
②
3’
第二轮复制得到4个分子,即①②③④各一个
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
变性:加热至90~95 ℃(解旋)
退火:冷却至55~60℃(引物结合)
延伸:加热至70~75℃(互补链合成)
①
②
3’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
5’
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
5’
3’
第三轮:
得到8个DN***段
有2个等长的。
也就是有2个X基因
第三轮:
得到8个DN***段
①②各1个
③④各2个
⑤2个
第四轮:得到16个DN***段
①②各1个得到①②③④各一个
③ 2个得到③⑤各2个
④ 2个得到④⑤各2个
⑤2个得到⑤4个
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