文档介绍：兰州理工大学
硕士学位论文
根癌农杆菌介导AtPCS1基因转化甘肃紫花苜蓿的研究
姓名:王兆胡
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:王鸣刚
20100501
摘要首先,研究了陇东、甘农三号、甘农一号等九个基因型的紫花苜蓿的子叶、取部分转基因苗的叶片进行旧ê蚉鉴定,结果表明彳俨禄利用植物修复重金属污染的土壤是一种“绿色”低成本的环境修复手段。本实验通过遗传转化技术将重金属螯合肽合成酶基因转入生物量大、适应性强的紫花苜蓿中,以期获得能富集重金属的转基因植株,为今后的污染土壤修复工作提供基础材料。真叶和胚轴在不同培养基上的愈伤组织形成及分化能力。结果表明:子叶的再生能力强于叶片和胚轴;陇东和甘农一号两个品种分化能力最强,%,。进一步比较了陇东、甘农三号和甘农一号的真叶、胚轴、子叶、茎段不同外的植体的分化再生能力,茎段在养基上可以直接分化出苗,子叶较胚轴和叶片分化时间短,且丛生芽形成数量多。再生芽可在原培养基上直接分化出苗,并在蔗糖浓度为.//嘌上完成生根。其次,用植物表达载体;└司鶯和,经菌落ɑ竦醚粜跃捎靡杜谭ǘ月ざê透逝┮缓帕礁銎分植煌嘈的外植体遗传转化,通过橹旧ḿ岸钥剐杂说男纬陕史治觯峁表明:子叶是适合转化的最佳外植体;陇东和甘农一号苜蓿子叶的转化效率无显著差异。转化后的外植体在含有卡那霉素和头孢霉素的嘌戏只浚培养基上顺利完成生根。在苜蓿中得以表达。该基因的转录、翻译情况以及转基因植物对重金属耐受性能还需进一步的试验。关键词:植物修复;紫花苜蓿;组织培养;;遗传转化
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作者答名:移彤钥嗍例解钿卯砌朋陟凇兰州理工大学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书弘一挠ⅰⅰ本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权兰州理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芡拧朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊
第文献概述苜蓿组织培养的研究状况对紫花苜蓿再生体系的研究,国外是在上个世纪年代至年代期间处于研和可靠的组织培养技术还远远不够成熟。由于苜蓿基因组较大,研究难度增加等】对銎分龌蛐偷淖匣ㄜ俎W隽嗽偕笛椋捎萌质笛榉桨附斜高度遗传的,可通过轮回选择的方法将植株再生能力提高。王瑞云等【ü诱导出愈伤组织,品种间不存在明显差异,但将各品种叶片诱导形成的愈伤组织转到分化培养基上时,只有品种超级钪沼盏汲裳浚擅缏式鲇%。,近年来国内外对其进行了全面深入的研究,发现具有一定的“模式植物’’的特点,并取得了可喜的成果【。但是,制约其快速发展的问题是栽培品种的基因型差异大,给建立~个普适、稳定的再生体系带来诸多困难,做为转基因的材料,即便是采用已经成熟的转基因方法,有效性还是很低。究高峰期,并且得到了一些较为理想的成果,国内研究起步相对较晚,初步取得一些研究成果【’。许多品种的紫花苜蓿再生体系虽说已经建立,可是较为普适生物技术在作物改良上的应用已经很广泛,但牧草的研究起步较晚,尤其将转基因牧草用于环境修复的在国内报道很少。我国早期的研究者建立的再生体系并未立即应用到基因工程上,随着西部退耕还林还草的实施以及污染环境的亟待治理,这种传统牧草品种日益成为稀缺资源,利用生物技术进行牧草育种和牧草基因修饰显得日趋必要,故对紫花苜蓿再生体系的研究需要做出更为深入和广泛的研究。.蛐许多研究表明,基因型对紫花苜蓿组培再生有着深刻的影响。年,较得出,再生能力强的基因型无论选用何种方案和外植体,都能产生体胚;而其他的基因型则只在选取特定的方案和外植体才能产生体胚;