文档介绍：安徽医科大学
硕士学位论文
SjGST和佐剂mIL-12及CpG对增强Sj14-3-3DNA疫苗的保护作用
姓名:胡元生
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:沈继龙;汪学龙
20050501
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籨异硫氰酸荧光素开放阅读框磷酸盐缓冲液聚合酶链反应间接免疫荧光单克隆抗体邻苯二胺四甲基乙二胺聚乙二醇猵安徽医科大学硕士学位论文甧
.学位论文独创性声明学位论文使用授权声明学位论文作者签名:翅磊生期:—.本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均巳在论文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在船密后适用本规定。学位论文作者签名:胡元生—一导师签名日期:—,日期:日..
妥艏羗一和栽銮縎—呙绲谋;ぷ饔中文摘要研究生胡元生教授副教授安徽医科大学病原生物学教研室安徽省基因研究重点实验室合肥目的:从曰本血吸虫泄舐街成虫中扩增出日本血吸虫信号蛋白—.┰鲂∈蟀捉樗兀嗦胄蛄校寺≈真核表达载体.,并验证其能表达出重组蛋白;利用该重组质粒免疫/∈螅鄄炱涠孕∈罂寡N娓腥镜谋;ぷ饔茫约对特异性固濉⑵⑾赴置诘南赴蜃蛹癈虲嚷实挠跋臁方法:┰霾锟寺∪胝婧吮泶载体.。用、间接免疫荧光和法验证其在体外一赴表达,制备无内毒素小鼠呙纾急雌雄兼用。除对照组外,每组均给予日本血吸虫呙危螅笸燃∪庾⑸,导师沈继龙汪学龙免疫小鼠。/∈芰洌逯随机分成椋孔只,等方..—壬徽医科大学硕士学位论文
阳"賞组;②.一—④.—甤⑤对照组:肌肉注射等容积的生理盐水。实验组②、③和④┐蚊庖吆芫共科し舾腥救毡狙N嫖豺士酰蟆N豺使セ鞲腥竞λ佬∈螅忻啪猜龉嘧⒊逑词占虫,计算减虫率;并计数肝组织虫卵计算减卵率。常规椒ḿ觳庋清抗—特异性虸?∈笃脏和赴浚扑鉉疌细胞比率。结果:扩增出约及大小的危晒Φ亟淇寺∪.;∮隤扩增产物一致的插入片段;测序证实均具有完整开放读码框,均为无意突变。纯化上述质粒,转染至细胞,经新霉素筛选得出阳性单克隆细胞株。经、及间接免疫荧光实验证实,其在细胞内分泌表达。小鼠呙缑庖吆的后腿肌肉冰冻切片,间接免疫荧光实验证实重组质粒在体内表达。配用不同佐剂/闹刈閟核酸疫苗小鼠的结果表明:核酸疫苗佐剂/.,、.及芄幻飨蕴岣咭呙对小鼠抗血吸虫感染的保护性免疫作用,减虫率和减卵率均有所提高,减虫率:..—槲%,加过免疫佐剂/—.一椋籹~免疫组的减虫率分别提高到:.一—...槲%;:.ィ%,.。./
胞培养上清煌碳の铮篊蛃——核酸疫苗要高,小鼠一暮勘化如下:在刺激下,加艏磷榻系ザ朗褂肧疫苗组要高,:加艏磷橹谐思尤雖。组外,,赴覵/,因此,/赴谋嚷适羌覵/佐剂的三组均较单独使用—呙组要低。结论:本研究成功地扩增、克隆了—和颍验证了其在体内外的表达,——孕∈笱N虫感染的保护性免疫作用,它们主要通过增强体液免疫和/或细胞免疫机【关键词貉N娌⑷毡狙N.⒑怂嵋呙纭⒆艏痢⒐—怂嵋呙缱橛忻飨陨摺<尤隨/佐剂组脾细制发挥作用。肽一蛔R泼浮⒈;ば悦庖上佐剂/螅寡G逄匾煨訧、和。抗体水平较单独安擞医科大学硕士学位论文
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