文档介绍：双向免疫扩散试验
纯度检测方法二:
一实验目的
学****双向免疫扩散实验原理
掌握双向免疫扩散实验操作方法
基本概念
抗原:抗原(antigenicity)是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。
抗体:抗体(antibody)指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
二实验原理
双向免疫扩散是一种定性试验。将抗原、抗体分别加入琼脂板相对应的小孔中,使两者互相扩散,在比例适当处形成可见的沉淀线。观察沉淀线的位置、数量、形状,以及对比关系,可对抗原或抗体进行定性分析,常用于:
(1)抗原或抗体的纯度鉴定。也可对抗体效价进行初步估算。
(2)用已知抗血清(或抗原)检测未知抗原(或抗体)
(3)抗原或抗体相对分子量的估计
双向免疫扩散常见孔型有三孔型、双孔型、双排孔型、梅花孔型(见图1)
图1 双向免疫琼脂扩散孔型
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三孔型
双孔型
梅花孔型
双排孔型
三试剂与器材
:,加115ml M HCl,最后补水至1000ml,。
:5g琼脂糖加500ml上述缓冲液,微波炉加热煮沸溶解。注意用中小火,以免暴沸。
:I号峰、II号峰、III号峰
、羊抗人LDL抗体、羊抗人apoA-I抗体。
、微波炉、刻度吸管、培养皿、下口径2mm滴管等
四操作步骤
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