文档介绍：双双向向免免疫疫扩扩散散试试验验纯度检测方法二: 一实验目的一实验目的?学****双向免疫扩散实验原理?掌握双向免疫扩散实验操作方法基本概念基本概念?抗原:抗原( antigenicity )是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。?抗体:抗体(antibody) 指机体的免疫系统在抗原刺激下,由 B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。二二实验原理实验原理?双向免疫扩散是一种定性试验。将抗原、抗体分别加入琼脂板相对应的小孔中,使两者互相扩散,在比例适当处形成可见的沉淀线。观察沉淀线的位置、数量、形状,以及对比关系,可对抗原或抗体进行定性分析,常用于: (1 )抗原或抗体的纯度鉴定。也可对抗体效价进行初步估算。(2 )用已知抗血清(或抗原)检测未知抗原(或抗体) (3)抗原或抗体相对分子量的估计?双向免疫扩散常见孔型有三孔型、双孔型、双排孔型、梅花孔型(见图 1) 图图 1 1 双向免疫琼脂扩散孔型双向免疫琼脂扩散孔型○○○○○○○○○○○○○○三孔型双孔型梅花孔型双排孔型双排孔型三三试剂与器材试剂与器材 : 加水溶解,加 115ml M HCl ,最后补水至 1000ml ,pH 。 : 5g琼脂糖加 500ml 上述缓冲液, 微波炉加热煮沸溶解。注意用中小火, 以免暴沸。 : I号峰、 II号峰、 III号峰 IgG 抗体、羊抗人 LDL 抗体、羊抗人 apoA -I抗体。、微波炉、刻度吸管、培养皿、下口径 2mm 滴管等四四操作步骤操作步骤 1. 制板:用