文档介绍：双双向向免免疫疫扩扩散散试试验验纯度检测方法二: 1一实验目的一实验目的?学****双向免疫扩散实验原理?掌握双向免疫扩散实验操作方法 2基本概念基本概念?抗原:抗原( antigenicity )是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。?抗体:抗体(antibody) 指机体的免疫系统在抗原刺激下,由 B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。 3二二实验原理实验原理?双向免疫扩散是一种定性试验。将抗原、抗体分别加入琼脂板相对应的小孔中,使两者互相扩散,在比例适当处形成可见的沉淀线。观察沉淀线的位置、数量、形状,以及对比关系,可对抗原或抗体进行定性分析,常用于: (1 )抗原或抗体的纯度鉴定。也可对抗体效价进行初步估算。(2 )用已知抗血清(或抗原)检测未知抗原(或抗体) (3)抗原或抗体相对分子量的估计?双向免疫扩散常见孔型有三孔型、双孔型、双排孔型、梅花孔型(见图 1) 4图图 1 1 双向免疫琼脂扩散孔型双向免疫琼脂扩散孔型○○○○○○○○○○○○○○三孔型双孔型梅花孔型双排孔型双排孔型 5三三试剂与器材试剂与器材 : 加水溶解,加 115ml M HCl ,最后补水至 1000ml ,pH 。 : 5g琼脂糖加 500ml 上述缓冲液, 微波炉加热煮沸溶解。注意用中小火, 以免暴沸。 : I号峰、 II号峰、 III号峰 IgG 抗体、羊抗人 LDL 抗体、羊抗人 apoA-I 抗体。、微波炉、刻度吸管、培养皿、下口径 2mm 滴管等 6四四操作步骤操作步骤 1. 制板:用移液