文档介绍：超声细胞粉碎提取黄芪多糖
【摘要】目的研究超声细胞粉碎仪对黄芪多糖提取的影响。方法超声细胞粉碎与水煎煮、碱提分别提取黄芪样品,比较3种方法获得的多糖纯度。结果超声细胞粉碎提取得到的黄芪多糖纯度最高,水煎法次之,碱提法最差。结论超声细胞粉碎仪适宜黄芪多糖的提取。
【关键词】黄芪多糖;超声细胞粉碎;黄芪多糖
Abstract:Objective To study the effect on the extract of Astragalus harides by ultrasonic cell disrupter. Methods Astragalus harides was extracted by Ultrasonic Disrupter, boiling in water and soakage in alkali, pared the content of harides respectively. Result The content was the highest by ultrasonic disrupter, the second was by boiling in water, the worst was by soakage in alkali. Conclusion Ultrasonic disrupter is suitable to extract Astragalus harides.
Key words:Astragalus harides;ultrasonic cell disrupte;Astragalus harides
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) (Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.)。黄芪多糖是黄芪的主要成分之一,其可显著提高机体的免疫力,增强人体细胞的生理代谢作用,能显著促进骨髓造血细胞DNA合成,加快有核细胞分裂过程,对体内血糖水平有双向调节作用。黄芪多糖在体外具有增强LAK细胞杀伤活性的作用,在体内对荷黑色素瘤B16细胞的C57BL/6 鼠具有显著增强IL-2/LAK抗肿瘤作用,延长其生存期[1]。目前已有黄芪多糖冲剂、黄芪精口服液、黄芪注射液等药品用于临床,其提取工艺的选择直接影响到药品的质量。超声细胞粉碎法是利用超声作用将组织细胞破碎,释放内溶物,实验表明,超声细胞粉碎法提取黄芪多糖含量较高。
本实验采用超声细胞粉碎研究提取黄芪多糖的工艺,现报道如下。
1 材料和仪器
黄芪药材购于沈阳市中街百盛药店,经鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. (Bge.) Hsiao。
JY92-Ⅱ超声细胞粉碎仪(宁波新芝科器研究所),722型光栅分光光度计(山东高密彩虹分析仪器有限公司)。
2 方法与结果
黄芪样品的前处理
称取黄芪样品置于圆底烧瓶中,加80%的乙醇回流提取3 h后取出,烘干后备用。
超声细胞粉碎提取法
g,放入三角瓶中,加入8倍量的蒸馏水,连接于超声细胞粉碎仪上,调整工作时间99 s和间隔时间1 s,工作次数36次。开始超声处理,并逐渐调节工作压力至最大。1 h后取出,过滤,向滤渣中再加入6倍量的蒸馏水,调整工作时间99 s,间隔时间1 s,工作次数24次。超声处理,并逐渐调节工作电压至最大,40 min后取出过滤,并合并2次滤液。将滤液按1∶ mL,再加入3倍量的95%乙醇进行沉淀,沉淀干燥后称量。
黄芪多糖的传统提取工艺
水煎法
g置于烧杯中,首先加入8倍量的蒸馏水,煎煮1 h后过滤,然后再向滤渣中加入6倍量的蒸馏水,煎煮40 min后过滤。将2次滤液合并。抽滤除杂,将滤液取出,按1∶ mL,加3倍量的95%乙醇进行沉淀,待所得样品沉淀干燥后进行称量。
稀碱浸提法
g置于烧杯中,加入8倍量的2%氢氧化钠,过夜12 h。过滤,取出上清,再向滤渣中加入6倍量的氢氧化钠,过夜12 h。滤出上清,并将2次滤液合并,除杂后用稀盐酸调至中性,按1∶ mL,加入3倍量的95%乙醇进行沉淀,待所得样品沉淀干燥后进行称量。
黄芪多糖含量的测定
采用苯酚硫酸法测定黄芪多糖的含量[2]。准确称取标准葡萄糖4 mg溶