文档介绍：黄芪多糖的提取和含量测定研究
黄芪为豆科植物,是蒙古黄芪或膜荚黄芪的干
燥根,主要药理成分是黄芪多糖(APS)和黄芪甙。
APS在医学和兽医临床上研究应用较为广泛,可作
为免疫促进剂或调节剂,同时具有抗病毒、抗肿瘤、
抗衰老、抗应激、抗氧化等作用(张立洲,1996;郭小
清等,2004)。目前APS的提取主要采用水提取和
CaO提取两种工艺,水提取分离工艺不成熟,效率
较差,提取成本较高,严重影响了APS的研究开发
利用。李红民等(2000)报道,用pH9~10的CaO水
溶液提取APS,得率显著提高,成本下降。我们用水
提取法和CaO溶液提取法进行APS的提取并测定
含量,以便从中筛选出较好的提取方法,为生产实
践提供参考。
1材料与方法
黄芪根:购自平凉市某中药材门市部。
葡萄糖、苯酚、浓硫酸、95%乙醇、***,均为分
析纯。21分光光度计,TN型托盘式扭力天平,容量
瓶,水浴锅,干燥器,粉碎机等。
。水提取法用蒸馏水煮
沸提取,CaO溶液提取法用pH9~10的CaO溶液煮
沸提取,,以后两法步骤相同。
①称取黄芪根1kg,去掉杂质和泥土,粉碎成
粉末。②黄芪根粉末中加以6~7倍的蒸馏水(或
CaO溶液),,用4层纱布过滤,滤渣用同
样方法煮沸3次。③合并滤液,,
加热浓缩至一定量。④将浓缩液以2 000r/min离心
10min,上清液中加3倍量95%乙醇沉淀。⑤倾去
上清液,沉淀物中再加入95%的乙醇至浓度为
80%,静置,倾出上清。⑥滤渣用***洗涤2次,过
滤。将滤渣放入干燥器中,-20℃冷冻真空干燥,即
得到APS。
:①葡萄糖标准溶
液的制备。取经105℃干燥至恒重的葡萄糖
100mg,置100mL容量瓶中加水溶解,并稀释至刻
度,摇匀。精密量取10mL,置10mL容量瓶中,加水
至刻度,摇匀,。
②标准曲线的绘制。准确吸取葡萄糖标准溶液
~,分别置25mL容量瓶中,加蒸馏
水补充至2mL,再加入5%,摇匀,
,摇匀,,置80℃
水浴中加热15min,取出,迅速冷却至室温。另以
,在
490nm波长处测定吸光度,并求出回归方程:C=
-×10-3,r=。其中C︰葡萄糖
浓度,A︰吸光度。③黄芪多糖含量测定。取提取并
经105℃干燥至恒重的APS 50mg,置于50mL容量
瓶中,加蒸馏水溶解至刻度,摇匀,准确吸取10mL,
置100mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,
。
,,加
蒸馏水补充至2mL,依法测定吸光度值,并代入回
归方程计算,求得APS的相对含量。
2结果与分析
提取的APS为灰白色粉末,易溶解于水,溶液
呈乳白色,无杂质。
从表1可见,水提取法APS收率为3