文档介绍：上海交通大学
硕士学位论文
上海透析患者Fabry病酶筛查及突变α-gal分子构象研究
姓名:吕轶伦
申请学位级别:硕士
专业:临床医学内科学(肾脏病学)
指导教师:陈楠
20080401
上海透析患者 Fabry 病酶筛查及突变α-gal 分子构象研究

摘要

Fabry 病是一种少见的、以 X 连锁方式遗传的溶酶体贮积病
(lysosomal storage diseases,LSDs),男性新生儿的发病率约为 1/40000。
其发病机制是由于 GLA 基因突变导致α-半乳糖苷酶 A(α-gal A)活性
缺失或下降,致使鞘糖脂代谢出现异常,在机体血管内皮细胞及肾脏、
心脏、皮肤、眼及神经系统等组织沉积,最终导致受累脏器的缺血性损
害。
本研究在已建立的外周血粒细胞α-gal A 活性检测基础之上,在国
内率先建立干燥血滴滤纸片(干血滤纸片)酶活性的检测方法并分别检
测 16 例男性半合子、11 例女性杂合子和 30 例正常对照,同时检测上述
被检测者的外周血粒细胞酶活性。男性半合子干血滤纸片和外周血粒细
胞α-gal A 酶活性值分别为 ·ml-1·h-1 (0- nmol·ml-1·h-1)和
nmol·h-1·mg-1(- nmol·h-1·mg-1),均不足正常值的 10%,易于与
正常人区分,干血滤纸片和外周血粒细胞酶活性检测对男性半合子特异
性和敏感度均为 100%,可作为筛检 Fabry 病半合子的可靠手段。女性
杂合子干血滤纸片和外周血粒细胞酶活性检测各有 7 例和 5 例结果处于
临床正常值参考范围内,敏感度分别为 %和 %,对于疑诊
Fabry 病的女性受检者必须通过基因检测才能确诊。外周血粒细胞酶活
性检测值较为准确,适用于家系调查、评估病情和判断预后,而干血滤
纸片酶活性检测具有准确、方便、快捷、经济,易于保存和运输等优点,
是 Fabry 病筛查和远程诊断的重要手段。
本研究第二部分运用干血滤纸片酶活性检测方法在上海市 12 个透
析中心 1544 例维持性血液透析患者中进行 Fabry 病筛查,检出 1 例经典
型男性半合子患者,在男性血液透析人群中检出率为 %,与既往文
献报道的检出率一致。筛查 118 例腹膜透析患者,检出 1 例迟发型男性
半合子,在男性腹膜透析人群中检出率为 %。我们对这 2 例先证者
的 14 名家系成员进行家系筛查,共检出 11 例患病家系成员。本研究提
高了 Fabry 病尤其是迟发型的诊断率,丰富了 Fabry 病家系库,并为病
人提供治疗方案和咨询,减少了疾病给家庭和社会带来的影响及隐患。
本研究第三部分对本学科既往所发现的 12 种错义突变类型进行
α-gal 分子构象模拟,分析突变对分子结构和临床表现的影响。在迟发型
患者中,α-gal 主、侧链受影响原子较少,而在经典型患者中,受影响原
子较多。活性位点突变患者酶活性低于隐蔽区域位点的突变,且与受影
响原子数无关,临床均表现为经典型;而隐蔽区域位点突变酶活性高于
活性位点突变,且其受影响原子数与患者残余酶活性及 MSSI 评分存在
相关性。结合突变位置和受影响原子数可初步预测 Fabry 病患者临床表
型和酶活性,有望今后应用于 Fabry 病患者病情和预后的判断。

关键词: Fabry 病,α-半乳糖苷酶 A,干血滤纸片酶活性检测,筛查,
突变α-gal 分子构象
SCREENING FOR FABRY DISEASE AMONG SHANGHAI
DIALYSIS PATIENTS AND STRUCTUAL STUDY ON
MUTANT α-GALACTOSIDASES

ABSTRACT

Fabry disease is an X-linked lysosomal storage disease. The deficiency
of lysosomal hydrolase α-galactosidase A (α-gal A) leads to accumulation of
globotriaosylceramide in ans including kidney, skin, cornea and
heart which results in variable clinical manifestations.
In order to establish the screening p