文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
l<,4>诱导的大鼠肝损伤和肝纤维化过程中的变
化
姓名:华静
申请学位级别:博士
专业:内科学(消化内科)
指导教师:邱德凯
20050401
等骂上海第二医暑:学偾住靑日期:川琕,学位论文使用授权声明导师签名:三乍ㄈ纭ⅲ学位论文独创性声明本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已经在文中作了说明并表示感谢。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在得的研究成果。据我所知,除文中已注明引用的内容外,本论文不包作者签名:。如。┮酥学位论文作者签名:日期:
内毒素是革兰氏阴性杆菌细胞壁外层的结构成分,也即脂多糖B愿尾』颊叱S醒=诙舅厮缴撸⒂敫尾〕潭相关。越来越多的资料证实肠源性内毒素是慢性肝病的一个重要的共同致病因子。径在活化效应细胞中具有重要作用。内毒素首先与内毒素结合蛋白胞膜上的内毒素受体结合,启动跨膜信号传递,最终引起核转录因子的活化。导致失控性的细胞因子和炎症介质的表达,发挥内毒素的作用。研究发现细胞膜上存在多种内毒素受体。内毒素受体的表达状态与细胞功能状态明显相关。存在和/或基因突变或缺失的小鼠,对叨刃淌堋目前已发现在正常的肝脏赴⒏蜗赴械退降腃蚑基因表达。在体外,细胞因子、内毒素和酒精能上调这些受体的表达。然而在慢性肝损伤和纤维化的过程中,内毒素受体的动态变化尚不清楚。因此,在本文中以Fは伦⑸浯笫笾谱髀愿嗡鹕撕拖宋锬P停捎妹庖咦榛等方法从蛋白和基因表达水平动态观察在肝病的演变过程中肝组织中内毒素受体的表达变化,基质显色法测定大鼠血浆内毒素水平,并分析两者的相关性。结果理芷餋泶镉衷黾印C庖咦榛觳釩鞍椎谋泶锒周和苁毖粜韵赴疃唷周时,阳性细胞明显减少,而到周肝硬化形成时阳性细胞又增多,位于纤维问隔内,假小叶内基本未见阳性细胞。大鼠外周血内毒素浓度在肝损伤的过程中升高。⒔橹剩俳蚣重肝脏的损伤。随着近年对内毒素作用机制的深入研究,发现内毒素介导的跨膜信号转导途琇纬筛春衔铮驦—春衔镉胂发现,正常大鼠肝组织仅有低水平的表达水平均明显增加,苁贝锔叻澹周后下降,但周时位,发现正常肝组织中仅有少量的窦周细胞呈阳性染色。周起阳性细胞数目明显增多,以肝非实质细胞为主,部分肝细胞也出现胞浆染色阳性,上海第二医科大学临床型博士论文的表达。4、
制中具有重要作用,因此越来越多的研究聚焦于内毒素活化赴幕啤本研究量在了解赴诙舅厥芴宓谋泶锉浠隟细胞的功能状态的关系。我们采用联合酶原位灌流消化、不连续密度梯度离心及选择性贴壁法分离正常及DP痛笫蟮腒细胞。采用法测定赴诙舅水平明显增加,苁绷秸叩谋泶锵陆怠周和艿腒细胞在体外的基础V捣置诹棵飨愿哂谡4笫蟮姆置谒健处理堋周和周的大鼠的赴谔逋釲刺激下分泌的谒较灾哂诨》置,的活化及增殖是一个重要事件。赴茄字⒔橹省⑾赴蜃蛹了解体内活化的赴訦增殖的影响,我们将从P痛笫蠓掷氲赴嘌谱魈跫嘌处理不同对相的大鼠的赴嘌涸谔逋饩苊飨源俳鳫的增娟,以处理艿腒细胞的培养液的作用最强。在饔孟翶细胞的这种促增殖作用进一步增强。诟卧嗟难字⒑拖宋讨芯哂兄匾W饔谩Q芯糠⑾諰能引起的炎性过程,因此我们推测饔糜贖细胞的作用途径也可能与内毒素受体介织内毒素受体基因的表达与血浆内毒素水平明显相关。赴嵌ň佑诟文诘木奘上赴鼙恍矶喾肿蛹せ睿罨腒细胞可分泌许多细胞因子和炎症介质。由于内毒素和赴诟尾〉姆⑸受体的表达,以ḿ觳庠谔逋釲作用下赴置谙赴蜃拥哪力。结果发现,『4笫蟮腒细胞表达低水平的,未检测到的表达。处理堋周和艿拇笫蟮腒细胞、量,呈浓度依赖关系,以处理艿拇笫驥细胞分泌的硭缴在从肝脏的炎症损伤进展到肝纤维化进程中,肝星状细胞促纤维化因子的一个重要来源,在活化状态时其分泌细胞因子能力明显增加。为壬ǚü鄄霮蚅对鲋车挠跋臁=峁允荆髦峙ǘ鹊腖或正常大鼠的赴奶跫嘌涸谔逋舛訦细胞的增殖无作用。的活化、收缩等,并且在饔孟翲通过分泌细胞因子和粘附分子参与肝脏、上海第二医科大学临床型博士论文高。.
关键词:内毒素,,,肝损伤,肝纤维化,赴涡亲聪赴导有关。我们采用原位酶灌流、密度梯度离心法分离正常大鼠的的影响。结果发现初分离的泶锏退降腃表达明显增加,并出现的表达。在饔孟翪的表达进一步增加