文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
血管内皮细胞激活与SIRS的实验研究
姓名:李磊
申请学位级别:博士
专业:外科学(普外)
指导教师:汤耀卿
20050501
作者签名;握日期;至￡:学位论文作者签名:枣磊日期:丕椋褐粒厚日期盟正:立:罗学位论文独创性声明学位论文使用授权声明本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子敝和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘委汇编了明确说明并表示谢意。出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。导师签名:/
血管内皮细胞激活与的实验研究学机剩都是全身炎症反应过度激话造成多器官损伤的结果。虽然局部又会造成机体自身的损伤。炎症反应过度激活过程中常伴随凝血的启动和调节功能紊乱,加重炎症激活和机体损伤。冈此,抑制炎症反应次提出全身炎症反应综合症炎症信号可通过血液循环播散到远离原发病灶的组织器官,使炎要的生理功能,被激活后通过多种途径参与炎症和凝血反应。在本研斡胫傅贾诙嘀匾5难字⒑湍O喙亟橹实激活和细胞核移位可以作为激活的标志。激活的—苁豆背景造成多脏器功能障碍综合征琈的原因有很多,常见的有严重令身感染、大量失血、创伤及急性重症胰腺炎等,但不论何种病因,发生的病理生理适当的炎症反应是机体的自我保护机制,但当炎症反应被过度放大时,过度激活和凝血活动紊乱是防治的主要目标,这也是目前危重痫医学领域研究的主要内容之一。为及时判断疾病的进程,在年美会议上首症反应不断放大直至失控。血管内皮细胞覆盖在血管系统内表面的单层扁平上皮细胞,是血液和组织矧的第一道屏障,因而最容易受到这些炎症信号的影响。同时还有多种重究中通过观察被细菌内毒素せ詈驟字⒑湍;虻谋达时相性,进一步明确在/进展过程中的作用。,是目前已知炎症反应中晟重要的转录调节风予,—蛄校迪肿B嫉骺刈饔茫庖惶匦圆受占浣峁沟挠跋欤蝗【鲇谔囟ǖ腄序列。实验室检测摘要母拍睢珽是井结合目的基因启动子的上海第二医科大彳,鹗畚,
激活,观察细胞炎症、凝血相关介质的表达以及细胞凋郝实谋せ詈拖赴艘莆唬煌眧日阋允凳庇ü舛表达水平,流式细胞技术分析细胞∈钡蛲雎省列,通过阳离子脂质体转入细胞,荧光显微镜下同处理组细胞炎症和凝血基因表达情况及凋亡率。。鼠尾静脉注射脂质体/春衔铮宜肠结扎穿孔法制备小鼠动物模型。只小鼠平均分椋篘处理组和假手术对照组。其中每组备挥谥颇时后宰杀取材进行病理学分析;其余每组只常饲养进行小时路石样排列,互相不重叠。免疫组织化学鼹示培养细胞鬃友钚运τ玫腅虴等方法即是利用核转录因子能识别特定蛄械奶匦陨杓频摹L逋夂铣砂眯蛄械乃碊片段,通过载体转入细胞核,占据相应核转录田予的侗鸸δ芮阻断同目的基因相应位点的结合,。制各小鼠模型,。该研究为/治疗的探索提供了实验依据。方法自人脐静脉获取血管内皮细胞,稳定培养和传代。激细胞,⒘魇较赴际跫癊等方法检测细胞炎症、,观察并比较不对体外培养的保护作用。低频超声挤压法合成高效阳离子脂质体河憔ǖ鞍祝旱碜碜%葡萄糖水存活率分析。结果自人脐静脉获取的在光镜下观察呈梭形或多角形,铺饔玫哪康摹訣仔运鹕说贾碌上海第二医利大学博十论文瓒一眭。—
跎傧赴蛲觥I鲜鼋峁な盗薔狵结论Ф∫约せ钐逋馀嘌难9苣谄は赴盏佳字ⅰ⒛激活和凝血级联反应启动,减少细胞凋亡。动物实验结果提示—せ詈拖胞核移位。实时荧光定量觳、一蚉—砗小时即显著上调,并且直到小时仍维持在较高水平。和表达水平无显著改变。砗小时凋亡比率较正常对照组细胞显著增加。芙档拖赴俗B家蜃拥腄结合活性,却不改鞍字屎俊7直鹨允凳庇ü舛縋和半定量后.、、表达下调,。和炎细胞侵润。,可能是非特异性因素的结果。相关基凼表达一5鳎蛲雎试黾印甼响转录因子细胞核移位,降低所调控基因的表达水平,防止炎症过度跚醩∈蠓蚊秆9苌┖脱紫赴秩螅岣呱媛省关键词:姐管内皮细胞核转录因子—炎症凝血圈套碳