文档介绍:上海第二医科大学
硕士学位论文
富血小板血浆修复骨缺损及其制作方法的实验研究
姓名:袁霆
申请学位级别:硕士
专业:骨科学
指导教师:张长青
20040401
制作方法的实验研究富血小板血浆修复骨缺损及其前言因子,如血小板派陛生长因子猟类胰岛素生长因子,取U庑┥ひ蜃釉赑中的浓度约为体内正常浓度丁的许多研究也证明了,唤瞿芗铀俟怯希箍杉铀偃碜橹挠合。然而,也有人对淖饔贸址炊砸饧鏷用春自体骨修复兔颅骨缺损对观察到⒚挥邢灾俳切薷矗富血小板血浆琍峭ü胄淖蕴全血而得到的含高浓度血小板的血浆。现已证实泻卸嘀稚和血管内皮细胞生长因子辏琒谔逋馀嘌斯撬杌氏赴米蕴錚干预,发现铀倭嘶氏赴纳ぃ⑶襊作用骨髓基质细胞定向分化为成骨细胞后其成骨活性较单纯培养细胞高。最早周薷垂侨损的研究开始于和利用春弦浦补切薷聪买⒐侨损,二者均发现,纱俳切薷础氖笛橄允荆春螾的移植骨修复速度比单用移植骨修复速度快.,、表皮生长因子丁=改;ひ蜃右籇蚑——猵的,5诙娇拼笱端妒垦宦畚
闹谱鞣椒ㄓ泻芏嘀郑煌闹谱鞣椒ㄆ銹肿申有效成份浓究春先斯す怯氲ゴ咳斯す切薷赐描愎侨彼穑教諴对长骨缺的实验显示种谱橹薷矗⑻岢稣饪赡懿⒖赑的浓度有关。度亦不同,从而可能影响宰橹薷吹淖饔谩N颐悄獠捎枚员妊损的修复作用;并对闹谱鞣椒ń醒芯浚教制渲谱鞣椒ǖ脑理。我们期望通过这些研究,能初步阐释饔糜诠侨彼鹦薷吹幕制。由于哂兄谱鞣奖恪⒍曰逅鹕诵⑽廾庖吲懦獾扔诺悖能确定俳切薷吹奶跫颐峭撇猓肞治疗骨缺损不愈合或延迟愈合将是一个简便、安全、价廉的方法。上海第二医科大学级硕士学位论文
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第一部分富血小板血浆促进骨缺损修复的实验研究上海第二医科大学级硕士学位论文
引言骨缺损修复一直是骨科临床面临的难题之一。近年来,骨组织工程学的发展为骨缺损修复开辟了新的途径。利用自体骨、异体骨、异种骨、人工生物骨、种子细胞、生长因子、转基因细胞等修复骨缺损是当今骨组织程学研究的热点。目前主要采用自体骨移植,异体骨移植和人工骨移植进行修复,但以上方法均存在缺陷。自体骨来源有限,取骨增加患者痛苦,且供但目前同样存在着供体来源不足的问题,此外还有传播肝炎、爱滋病等疾病的危险,异体间的免疫排斥也常常导致移植失败。异种骨虽然可以完全解决供体来源不足,但异种间的组织相容性问题使移植体难以存活。人工骨由人工合成制备,既可以无限制地大批量生产,解决供源问题,又由于人工骨由惰性物质构成,可以避免免疫排斥,然而单纯人工骨移植只能起骨传导作用,无诱导成骨活性,不适用于大块骨缺损。其主要原因为:缺损的中心区域由于与宿主组织相对远离,随着组织萄У姆⒄梗嗣欠⑾郑酶春铣晒窍赴蛏ひ蜃ゴ抗且浦骨区有顽固性疼痛、感染等并发症。同种异体骨虽然增加了供应来源,得不到充分的营养供应,导致成骨作用下降。表现为缺损中心区域骨组织形成少和软骨组织或纤维组织修复。赴逋馀嘌屯庠葱陨ひ蜃的人工骨修复骨缺损,弥补了单纯人工骨的缺点,可以产生良好的诱一、骨缺损修复的发展上海第二医科大学级硕士学位论文
年,等将体外培养的骨髓基质细胞附着于多孔晦瓷内再植入的%,芎蟪鱿忠徊惚嘀牵周后骨组织占据整个植入体⋯。物力学、工程学、分子生物学等各方面进行了大量的实验研究,证实到回植入体内需要几周时间,而且价格昂贵。在细胞培养过程中,需小牛血清等添加成份,其来源复杂,安全性还有待进一步研究。另外,骨吸收和骨塑形等方面起重要作用。近几年,有大量报道证明,复合种生长因子联合修复效果更佳。如和一駼联用,导成骨活性,在大块骨缺损的修复中也取得了满意效果。如旱在体内,发现有骨组织形成。芎蟪鱿殖晒窍赴窍赴继沾商寤右股血管周围,形成了带血管蒂的小梁骨,进行带蒂骨移植后结果表明其有良好的修复效果¨=嗄昀矗嗣且怨撬杌氏赴⒊晒前体细胞、成骨细胞等复合不同人工材料修复骨缺损,从组织学、生了骨髓基质细胞体外培养后回植入体内,仍具有良好的成骨能力,在不同的环境下可以形成骨组织。然而,骨髓基质细胞从采集,经扩增、细胞体外培养过程中如何调控细胞生长、防止细胞老化和避免免疫排斥等问题至今没有很好地解决¨K裕壳肮撬杌氏赴逋馀嘌回植入体内修复骨缺损还仅限于实验研究。生长因子是一类天然生物介质,可调节细胞增生、趋化、分化和基质合成等。迄今为止,已发现了多种对骨修复有影响的生长因子如:、取K窃诠窃偕生长因子的人工材料修复骨缺损可使修复速度明显加快¨,而且多冉ヅk殴悄こ晒窍赴胫Ъ芨春虾笠浦驳轿扌叵俅笫蟮上海第二医科大学端妒垦宦畚
是基因重组,二是从动物身上提取。这两种方法均费时较长,制作复杂。纯化的生长因子价格昂贵,生长因子的适用剂量及各生长因子之间的最佳比例还未阐明,而且外源性的生长因子常