文档介绍：上海第二医科大学
博士后学位论文
骨髓来源肝细胞的实验研究
姓名:朱薇
申请学位级别:博士后
专业:临床医学(消化)
指导教师:邱德凯
20020601
背景/目的骨髓相关细胞可以转化为其他组织如骨、软骨、肌腱、肺、自体的骨髓移植或体外诱导培养,为肝病患者提供鲁体肝细胞或肝脏的免疫磁珠分离系统将雄性小鼠骨髓中的造血干细胞分离出来作为单独的移植物,移植给通过放射致死剂量照射的/在移植后艿男∈蟾巫橹衅峡J汲鱿諽染色体阳性的肝细胞,胞的骨髓细胞中,阳性的造血干细胞是其中重要的一个亚群。骨髓间质干细胞的移植和检测中文摘要肝细胞可以来源于骨髓,或者能从骨髓细胞中定向诱导出肝脏干细胞干细胞。本文旨在研究骨髓中的细胞是否可以转化为肝细胞;将骨髓中细胞初步分类以证实何种亚群参与了向肝细胞转化的过程。目的研究骨髓细胞是否可以转化为肝细胞。方法通过放射致死剂量照射的/菩孕∈蠼邮苤芰湎嗯涞耐敌坌孕∈蟮娜ü撬枰植话,分别在移植后堋周、蕖月分批处死移植存活的小鼠。分别在游离的肝细胞和肝脏的石蜡切片上用荧光原位杂交的方法检测旧逖粜缘母蜗赴=峁谝浦埠个月的小鼠肝脏游离细胞和石蜡切片上均发现有旧逖粜缘母蜗赴J考伲肥荡骨髓造血干细胞的移植和检测目的研究骨髓造血干细胞是否可以单独转化为肝细胞。方法通过雌性小鼠。分别在移植后堋周、堋周分批处死移植存活的细胞。结果粜缘脑煅8上赴掷氪慷却笤嘉±ァ干细胞可以在体内单独转化为成熟的肝细胞,或者在可以转化为肝细目的研究骨髓间质干细胞是否可以单独转化为肝细胞。方法通过骨骼肌、脑等的前体细胞。这些试验给了我们~个很大的启示,如果或肝细胞,不仅为干细胞的可塑性又添了一个新的证据,而且可通过全骨髓细胞韵移植和检测在。结论在接受放射致死剂量照射但没有导致严重的急性肝脏损伤情况下,骨髓细胞可以转化为成熟的肝细胞。小鼠。在小鼠肝组织切片上用荧光原位杂交法检测旧逖粜缘母存活时间越长,旧逖粜愿蜗赴苍蕉唷=崧酃撬柚械脑煅体系在赴嘌渲信嘌┰鯩,同时去除骨髓中的其
他细胞。将扩增后的雄性骨髓间质干细胞移植给通过放射致死剂量照小鼠。在小鼠游离肝细胞和肝组织切片上用荧光原位杂交法检测色体阳性的肝细胞。结果骨髓间质干细胞移植后小鼠在天以内完全死亡,造血没有恢复。在游离肝细胞和肝组织切片上都没有发现有能恢复,存活时间不超过天。在短期内骨髓间质干细胞没有转化为肝细胞,但不能完全排除骨髓间质干细胞与肝细胞转化相关的可能性。关键词:肝细胞干细胞造血干细胞间质干细胞免疫磁珠分离法荧光原位杂交射的/菩孕∈蟆7直鹪谝浦埠周开始分批处死移植存活的旧逖粜缘母蜗赴=崧酃撬杓渲矢上赴ザ酪浦埠笮∈笤煅2
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进行修正,大多数生物学家和医学家认为干细胞是一类具有自我更新与发育,干细胞逐渐分化为特定类型并行使特定功能。很多成人组织含有年,分离人类胚胎干细胞并在体外培养首次获得成功。“’大大的激发了有多年历史,在治疗血液系统恶性疾病、实体肿瘤以及遗传性免疫缺陷言细胞在分化过程中往往由于高度分化而失去了再分裂的能力,最终衰老死亡。机体在发展适应过程中为了弥补这一不足,保留了一部分未增殖分化能力的细胞,能产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞,同时还能分化为祖细胞。哂凶晕腋潞托纬赏暾鎏宓姆只,它具有与早期胚胎细胞相似的形态特征存在很大的争议⋯。分化方向已确定的干细胞叫做多能干细胞ǚ只L囟ǖ淖橹缭煅8上赴将分化为血细胞,肝脏干细胞将分化为肝细胞;这些多能干细胞继续向,以及近年来发现的神经元干细胞,、肌肉干细胞、表皮层干细胞等都属于此类。”’随着机体的干细胞,当组织受到外伤、老化、疾病等的损伤时,这些细胞就增殖分化,产生新的组织来代替它们,以保持机体的稳定平衡。在所有的干细胞中,利用前景最为广阔的,还是分化能力最强的全能干细胞,生命科学界对干细胞的研究热情。但是目前全能干细胞只能通过胚胎获得,对受精卵、胚胎以及胚胎干细胞的研究由于受到伦理和法律的约束,开展深入的研究还有待于人类伦理观念的转化和法律的完善,在现行条件下对于多能干细胞和组织特异性干细胞的研究似乎更为实用和可行。侨嗣侨鲜蹲钤缪芯孔钌钊氲囊焕喔上赴移植用于临床已方面已取得了举世公认的成就。年代以来,分离和体外培养各种来源干细胞的技术不断成熟,引发了新一轮研究干细胞的热潮。人们纷纷前分化的原始细胞,称之为干细胞.。一旦需要,这些干细胞可按照发育途径通过分裂而产生分化细胞。干细胞亩ㄒ宥嗄昀床欢从干细胞到成熟细胞有许多分化阶段:最原始的干细胞是全能干细胞潜能;迄今为止,只有受精卵才符合这样的定义,囊胚期的胚胎干细胞和很强的分化能力,可以无限增殖并分化成为全身嘀窒赴嘈停从而