文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
离体脑损伤实验模型建立与静脉麻醉药物作用的比较
姓名:薛庆生
申请学位级别:硕士
专业:麻醉学
指导教师:于布为

离体脑损伤实验模型的建立与静脉麻醉药物作用的比较中文摘要目的利用大鼠皮层、海马脑片和神经细胞培养建立脑损伤离体实验模型,同时护作用。方法制备大鼠皮层和海马脑片,原代培养胎鼠皮层神经细胞,电生理丙酚的作用效果。结果制备的海马脑片芄晃榷ḿ锹嫉饺禾宸宓缥。结论通过脑片孵育和神经细胞培养可以方便有效的建立脑损伤离体损伤模型,采用新鲜脑片与氯化三苯四唑氮芤汗餐跤⒂谢芗脸提比色法,培养神经细胞四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法法饬课光度值靠疾焖鹕顺潭群吐劝吠W饔眯Ч云跤锨逡喝樗嵬亚奔溲映ぃげ愫秃B砟云琓染色明显降低,孵育上清液释放率度值档停訦鹕怂挛舛冉档臀薇;ぷ饔谩:蚈损伤的皮皮层脑片缺氧缺糖损伤模型,比较氯胺酮、眯唑安定、硫喷妥钠、异丙酚的脑保学方法检测脑片活性,建立缺氧缺糖劝彼帷⒐趸酶舛ā⒛云琓染色照相计算机图像灰度分析、病理切片染色方法考察脑片损伤程度。对于大鼠皮层脑片缺氧缺糖损伤模型,通过脑片染色、溶剂抽提定量比色方法,比较不同浓度氯胺酮、眯唑安定、硫喷妥钠、异三类损伤都能够明显降低皮层、海马脑片旧ê蜕窬赴鸐比色。随着逐渐增加,组织损伤百分率与头怕拭飨哉喙兀黄げ隳云瑀.,海马脑片琍.。旧障嗉扑慊枷窕叶确治觥⒉±砬衅琀染包也同样能够反映脑片鹕顺潭取B劝吠6哉7跤哪云团嘌窬细胞染色无影响,明显抑制牍劝彼崴鹕说贾履云蜕窬赴旧ê笪·和·糠旨跚酺染色降低值:“甃。炊又豑染色降低值:.建立方便有效的定量评价方法,考察氯胺酮对不同性质脑损伤的作用效果,通过层脑片旧ū冉希蠹亮康倪溥虬捕ê.,;异丙酚对皮层脑片鹕嗣挥凶饔茫蠹.,.,上海第二医辩大学瑶硕士研究生毕业论文
孵育、溶剂抽提比色的方法可以方便有效地定量评价脑片损伤程度和药物保护作实验模型。本实验制备的脑片具有良好的细胞活性。新鲜脑片与溶液共同用。氯胺酮对脑片和神经细胞的缺氧缺糖与谷氨酸损伤都有保护作用,而对过氧化氢损伤无保护作用。对于大鼠皮层脑片缺氧缺糖损伤模型,四种静脉麻醉药物脑保护作用由强到弱依次为:氯胺酮蚺缤啄咪唑安定毂印_溥虬捕和硫喷妥钠在超过临床使用范围的大剂量时有部分保护作用;临床剂量的异丙酚没有保护作用,相反,大剂量时会加重大鼠皮层脑片缺氧缺糖损伤。关键词:脑片神经细胞脑损伤定量评价静脉麻醉药物汉5诙癖绱笱狂炕蔷可弦德畚.
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定量分析。新近采用的新鲜脑片与芤汗餐跤⒂谢芗脸樘岷焐ḿ桌啊第一部分离体脑损伤模型和新型定量评价方法的建立与氯胺酮对不同性质脑损伤影响的实验研究前言缺血损伤的常用方法,以往染色后照相、计算机图像分析的方法,不能完全做到验中E嘌笫笊窬赴.,,并采用脑片旧ǎ在围术期发生的脑损伤中,以脑缺血再灌注损伤最为常见。如何积极预防和中,部分实验发现麻醉药物对脑缺血再灌注损伤有保护作用,然而,也有些实验脑缺血再灌注损伤主要的病理生理变化包括细胞能量代谢障碍、兴奋性氨基酸过度激活、氧自由基损伤。根据不同的病理机制,建立各自的脑损伤模型可以从机制上了解药物对脑缺血再灌注损伤的作用效果。缺氧缺糖、谷氨酸、过氧化染色是评价脑分光光度计比色技术,已被有效的应用于在体脑缺血和海马脑片缺氧缺糖损伤实比色法也是因此,本研究的目的在于利用大鼠新鲜脑片和培养的神经细胞,建立符合脑考察临床常用静脉麻醉药物——氯胺酮的脑保护作用。正确治疗围术期的脑缺血再灌注损伤是麻醉医生面临的临床课题。在以往的研究获得了相反的结论。脑缺血再灌注损伤复杂的病理生理机制,实验模型之间的差异,以及评价方法本身的局限性等因素造成对这些研究结果评判非常困难。因此,根据脑缺血再灌注损伤的病理生理机制,建立简单、客观、有效的脑损伤实验模氢是针对以上这三类病理生理机制的损伤方式。离体实验是一种方便有效的研究手段,多被用于药物机制研究。在脑损伤的众多离体实验中,脑片和神经细胞培养是最常采用的方法。脑片技术是一项具有在体实验优点的离体实验方法【俊,蝗交然牡_,籺定量评价细胞损伤程度和药物保护作用的常用方法【。机溶剂抽提、比色的方法建立一种简单、客观、有效、定量的评价方法,并与同为离体实验的神经细胞壬ǚ椒ū冉希焕媒⑵鸬氖笛槟P秃推兰鄯椒型和评价方法就显得尤为重要。.,籨姆凳二医辩大学羁碗士研究生毕业论文.
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