文档介绍：反相高效液相色谱法测定硫酸软骨素钠的含量
【摘要】目的:建立一种高效液相色谱法测定硫酸软骨素钠的含量。方法:C18色谱柱,流动相为乙***-10mmol?L-1戊烷磺酸钠溶液(10:90),检测波长为191nm,?min-1。结果:~?mL1范围内与峰面积有良好的线性关系,r=。结论:该方法简便、快速、准确,可用于硫酸软骨素钠的含量测定。
【关键词】硫酸软骨素钠;高效液相色谱法
【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)04-0690-01
硫酸软骨素钠系自动物的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织中提取制得的硫酸化链状黏多糖钠盐,为中国药典2010年版二部收载品种[1]。类别为降血脂及骨关节疾病治疗药,用于神经性头痛、神经痛、关节痛、动脉粥样硬化疾病的辅助治疗[2]。硫酸软骨素钠含量测定方法很多,其中分光光度法使用盐酸氨基葡萄糖为对照品,而硫酸软骨素钠水解产生的是氨基半乳糖,该法的专属性和重现性不好;美国药典、欧洲药典和英国药典采用电位滴定法进行含量测定,该法的缺点在于:***化十六烷基吡啶( CPC) 低温易析出,需重新配制使用,且CPC 与其他酸性黏多糖也有类似的沉淀反应,因此专属性不好[3]。《中国药典》2010年版采用的酶解HPLC法,具有专属性强、灵敏度高和重现性好的优点,但样品处理繁琐、耗时较长、酶贮运中较易失活。本文参照文献报道的各种方法[4-7],建立的反相高效液相色谱法测定硫酸软骨素钠的含量,方法操作简便、快速、准确。
1 仪器与试药
仪器岛津AUW120D电子分析天平, UV3000高效液相色谱仪(合肥皖仪科技),T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析),KQ-50B超声波发生器(昆山市超声仪器)。
试药硫酸软骨素钠对照品(中国药品生物制品检定所,批号140792-201001,%),硫酸软骨素钠样品(四川菲德力制药有限公司,批号:120201,120601,130101),乙***为色谱纯,其他试剂为分析纯,水为纯化水。
2 方法与结果
色谱条件色谱柱:C18柱(5μm,250mm×),流动相:乙***-10mmol/L戊烷磺酸钠溶液(10?90),检测波长:191nm,流速:,进样体积:10μl。
溶液的制备
对照品溶液的制备取硫酸软骨素钠对照品适量在105℃下干燥4小时,精密称取约25mg于50ml容量瓶中,***,振荡使其分散均匀,再加入纯化水,用超声波使其溶解,用水定容至刻度,摇匀,用滤膜过滤。
供试品溶液的制备取供试品约25mg,精密称定,置50ml容量瓶中,***,振荡使其分散均匀,再加入纯化水,用超声波使其溶解,用水定容至刻度,摇匀,用滤膜过滤。
***于50ml容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀即得。
流动相的制备 10mmol/L戊烷磺酸钠溶液:,摇匀即得。流动相:按乙***-10mmol/L戊烷磺酸钠溶液(10?90)制备流动相,混合均匀,过滤,超声备用。