文档介绍：第六章吸光光度法
1、教学目的:掌握光度法的基本原理,了解光度分析条件的控制,分光光度法的应用范围。
2、教学重点:Beer定律;光度分析的应用。
3、教学难点:光吸收原理;光度分析的准确度。
4、吸光光度法:基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,包括比色法和分光光度法。
5、分光光度法的优点:灵敏、准确、快速、选择性好、适于微量组分的测定。
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第六章吸光光度法
6-1 概述
6-2 光度分析法的设计
6-3 光度分析法的误差
6-4 其他吸光光度法和光度分析法的应用
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6-1 概述
6-1-1 吸光光度法的特点
6-1-2 光吸收的基本定律
6-1-3 比色法和吸光光度法及其仪器
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吸光光度法的特点
波长范围: 10-1 ~10nm 10~400nm 400~750nm ~1000μm ~100cm 1~1000m
光谱区域: X射线紫外光可见光红外
光谱微波无线电波
光是一种电磁波,根据波长或频率排列。
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吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱
光
单色光
复合光
光的互补
单一波长的光
由不同波长的光组合而成的光
两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光
光的互补示意图
红
黄
绿
蓝
青
紫
青蓝
白光
橙
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KMnO4溶液的吸收曲线 (cKMnO4:a<b<c<d)
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分子、原子、离子具有不连续的量子化能级,仅能吸收当照射光子的能量hv与被照射粒子的 E激- E基=(hv)n因为不同物质微粒的结构不同,共有不同的量子化能级,其能量差也不相同,因此对光的吸收具有选择性。若固定某一溶液的浓度 C 和液层厚度 b ,测量不同λ下的 A ,以吸光度 A 对吸收波长λ作图,就得到-吸收曲线,即吸收光谱。
初步定性分析:不同物质吸收曲线的形状与最大吸收波长不同。
定量分析:不同 C 的同一物质在吸收峰附近的 A 随 C ↑而增大,吸收曲线是吸光光度法中选择测定波长的主要依据。
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主要用于微量组分
特点:
(1)灵敏度高:测定含量为 1% ~ 10-3 %的微量组分及测定含量为10-4 % ~ 10-5 %的痕量组分。
(2)准确度较高:
比色法相对误差 5 % ~ 10 % ;
分光光度法相对误差 2 % ~ 5 % 。
(3)应用广泛,操作简便、快速。
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光吸收的基本定律
1、朗伯—比尔(Lambert—Beer)定律
①光通过溶液的情况:
Ia为吸收光强度
It为透过光强度
Ir为反射光强度
Io 表示入射光强度
Io = Ia + It + Ir
因为 Ir在测定试样和空白溶液时其影响可相
互抵消,故可简化为:Io = Ia + It
②透射比T(Transmittance)的定义
T =It/Io
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