文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
原发性胃癌分子细胞遗传学变化的研究
姓名:朱亚青
申请学位级别:博士
专业:外科学(普外)
指导教师:尹浩然

原发性胃癌分子细胞遗传学变化的研究中文摘要和鲆职┗虻耐槐淝榭觥4送猓采用半定量褪凳庇ü舛縋方法检测了蟌、和霭┗駾拷贝数变化情况。选扩增区域和丢失区域来研究受累的癌基因和抑癌基因在胃癌发病中的作用。常见现象,而它们在胃癌中的作用还不明确。我们检测了脑雍闲远J研究背景:胃癌的发生发展是一个涉及多种基因改变和多阶段致癌的复杂过程,包括癌基因的激活、抑癌基因的失活或丢失等。目前认为绝大多数肿瘤存在着两种水平的遗传不稳定性,小部分发生在核苷酸水平,可导致少量核苷酸发生碱基的置换、缺失和插入;但更多是发生在染色体水平,包括染色体整条或区域性的丢失或扩增。染色体的扩增或丢失区域存在着与肿瘤发生、发展密切相关的癌基因和抑癌基因。由于传统的实体瘤核型分析技术的困难,有关胃癌发生、发展过程中的遗传学变化荧光原位杂交現技术而发展起来的分子细胞遗传学技术,一次实验即可检测出整个基因组奖词浠榭觯允靖魈跞色体区带上奖词睦┰龌蚨JВ纱颂峁┮桓鋈ɑ蜃榈纳柰肌NA私原发性胃癌的遗传学变异情况,本研究采用际醴治鲈⑿晕赴┑腄序列拷贝数变异,以期能发现一些畸变的染色体区域,再从这些畸变的染色体区域中挑和俏颐荂发现的两个经常性发生丢失和扩增的区域。上已定位有数个抑癌基因和癌基因,大量研究发现,的变化在许多肿瘤中是一种了蟌虲癌基因奖词浠榭觥临床资料和方法:选用瑞金医院外科手术切除的并经病理组织学证实的例原发性胃癌标本及其对应的正常胃切端粘膜组织,以酚一氯仿一异戊醇法抽提基因组灾琢龀煞植蛔ナ辈捎孟晕⑽⑶懈罘椒āSτ肅检测其中例原发性胃癌的奖词浠榭觥S昧龈叨榷嗵缘奈⑽佬俏坏惴治隽赴组织在系脑雍闲远JВ币缘チ垂瓜蠖嗵苑椒,⒕苯硬庑蚣觳饬还知之甚少。比较基因组杂交瓹且幌罨跋喙鼗騍、和幕蛲槐洌涣硗饣狗治上上海第二医科大学博士学位论文
谖赴┲写嬖谧鸥咂档腖,在虳之间存在着一个最小共在所有染色体臂中只有、号和旧逦捶⑸斐8谋洹3<娜旧謇┰区域有,,,,,和咚降腄扩增区域有在胃癌中很少见,槐渎饰/型槐渚贒基因第密码子上,发生点突变,胞嘧啶惶婊晃N卩堰,由精氨酸相对拷贝数在胃癌和正常胃粘膜中比较无显著性差异,基因扩增率在胃癌中着与胃癌发生发展相关的癌基因和抑癌基因,是定位克隆胃癌相关基因的候选区域。结果:芯苛⑿晕赴┲辽儆幸桓鋈旧灞鄯⑸┰龌蚨JВ,—,·。常见的染色体丢失区域有,,和。平均每例肿瘤染色体臂变化数为┰。在肿瘤胃壁浸润至、时,其总奖椿涫⒗增数和丢失数均要高于浸润至、。应用位于系牧鑫⑽佬潜昙俏坏悖对例原发性胃癌组织进行杂合性丢失分析,%的病人至少有一个位点出⑸饰多见于淋巴结有转移的和诤廷羝谖赴┎∪恕N挥上的抑癌基因生率随着胃壁浸润深度的加深而升高,多见于肿瘤直径和胃癌病人;坏鉒多见于淋巴结转移的胃癌病人。虳耐槐甘氨酸N格疾课赴〥突变率高于胃体和贲门部胃癌,诤廷期槐渎室8哂赥诤廷蚱谖赴N挥上的癌基因基因拷贝数均显著高于正常胃粘膜,胃癌中扩增率为.%,┰雎饰.%。基因扩增与胃癌临床病理学指标之间无相关性。蚶┰龆嗉于淋巴结发生转移者。总奖椿涫屠┰鍪谖赴㏕⑸首罡叽%,其次⑸式系停鑫%,定位在虳洹虳位点发生钠德史直鹞%,.ズィ籗位点嗉诹馨徒嶙R萍癟疘期和Ⅳ期胃癌病人;位点姆疘期和Ⅳ期为.%,多见于肿瘤直径≥的和肠型胃癌。胃癌中和蛳喽结论:原发·眭胃癌中有多处染色体区域发生奖词洌庑┣蛑锌赡艽嬖现杂合性丢失。虳上海第二医科大学博±
同丢失区;虳可促进胃癌的进展和转移,是胃癌发展的后期事件。胃癌中虳氖Щ钪饕Mü雍闲远JВ苌俜⑸蛲槐洌欢蚣瓤赏ü雍闲远Jб部赏ü蛲槐涠Щ睢上的、关键词:胃肿瘤比较基因组杂交遗传不稳定性杂合’J拷贝数畸变基和┗蚩赡茉诓糠治赴┲蟹⒒幼饔谩因突变上海第二鞋科大学精±学谊诧史
.,...%±学位论文:甀甀甃.,,.·甐
甌%甌甌...—%%瑆骯Ⅳ././甌%,,,....甅,%,.ィ畆簦甌上海第二医科大学诲±学位论文甋.,篢琫,琣甌,,,,,琹瓾甌琯甃/,
...%,.%,騃..%±学证论文瑆甌,...甌瓺珺琣珼,
原发性胃癌分子细胞遗传学变化的研究前言标本既可以来自新鲜或冰冻的活检组织或细胞,也可以从培养的细胞株中提取,甚由于实体瘤原代细胞培养困难,所得到的高质量的中期分裂相较少,且染色体水平遗传学的方法具有高度的针对性和局限性,一次实验只能注重一个特定的基因和/或現技