文档介绍：第六章
吸光光度法
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化学分析:常量组分(>1%), Er %~%
依据化学反应, 使用玻璃仪器
化学分析与仪器分析方法比较
仪器分析:微量组分(<1%), Er 1%~5%
依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器
准确度高
灵敏度高
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吸光光度法的基本原理
特点:
灵敏度高:测定下限可达10-5~10-6mol/L,
10-4 %~10-5 %
准确度能够满足微量组分的测定要求:
相对误差2~5% (精密光度计为1~2%)
操作简便快速
应用广泛
吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。
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研究物质在紫外(200-400nm)、可见光区(400-800nm) 的分子吸收光谱的分析方法称为紫外-可见分光光度法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。
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光学光谱区
远紫外
近紫外
可见
近红外
中红外
远红外
(真空紫外)
10nm~200nm
200nm
~380nm
380nm
~ 780nm
780 nm
~ m
m
~ 50 m
50 m
~300 m
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分子吸收光谱的产生
电子能级
振动能级
转动能级
分子内部运动的方式有三种,即电子相对于原子核的运动;原子在平衡位置附近的振动和分子本身绕其重心的转动,、振动能级和转动能级。下图为分子的能级示意图。
当分子从外界吸收能量后,产生电子跃迁,即分子最外层电子(或价电子)基态跃迁到激发态。
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3. 溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱
/nm
颜色
互补光
400-450
紫
黄绿
450-480
蓝
黄
480-490
绿蓝
橙
490-500
蓝绿
红
500-560
绿
红紫
560-580
黄绿
紫
580-610
黄
蓝
610-650
橙
绿蓝
650-760
红
蓝绿
不同颜色的可见光波长及其互补光
7
300
400
500
600
700
/nm
350
525 545
Cr2O72-
MnO4-
Absorbance
Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱曲线
350
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苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱曲线
苯(254nm)
甲苯(262nm)
A
230 250 270
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4. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律
A=lg(I0/It)=kbc
It
I0
b
dx
I
I-dI
s
朗伯定律(1760) A=lg(I0/It)=k1b
比尔定律(1852)
A=lg(I0/It)=k2c
吸光度
介质厚度(cm)
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