文档介绍：血清谷丙转氨酶测定
1、原理
转氨作用:将α-氨基酸的氨基通过酶促作用转移
到α-酮基上,生成相应的酮酸与氨基酸的反应。催化这
一反应的酶称为转氨酶。
转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。在肝、心、
肾等组织中,谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)
的活性均较高。在正常的新陈代谢过程中,血清内两种
酶维持一定水平的转氨酶活性(即正常值)。
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血清谷丙转氨酶测定
当肝、心、肾等组织发生病变时,由于组织细胞肿
胀、坏死导致大量的酶释放到血流中,从而引起血清谷
丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性显著升高。因
此测定这些酶的活性对某些疾病的临床诊断具有重要的
参考价值。
本试验用丙氨酸和α-酮戊二酸为底物(基质液成分)
经血清谷丙转氨酶作用生成谷氨酸及丙酮酸。丙酮酸与
2, 4-二硝基苯肼作用生成2,4-二硝基苯腙,此物在碱性
条件下呈棕红色。根据棕红色的深浅与同样处理的丙酮
酸标准液进行比较,即可计算出酶的活性。其反应过程
如下:
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血清谷丙转氨酶测定
0
COOH
C O
CH3
NO2
H2N HN
NO2
COOH
C
CH3
NO2
N HN
NO2
+
丙酮酸-2,4-二硝基苯腙棕红色,520nm处具特征光吸收,颜色深浅(OD520值)与丙酮酸含量成正比,可据此进行比色测定。
2,4-二硝基苯肼
COOH
C NH2
CH3
COOH
C O
(CH2)2
COOH
COOH
C O
CH3
COOH
C NH2
(CH2)2
COOH
+
+
谷丙转氨酶
Ala
Glu
α-KG
丙酮酸
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血清谷丙转氨酶测定
King氏法谷丙转氨酶活性单位:每毫升血清在37℃
,生成1umol丙酮酸为一个活
力单位。,报告数据以100ml血清
计算,因此实际侧得结果乘1000即可。
2、实验材料及试剂
实验材料:动物或人血清
实验试剂:丙酮酸标准液要求临用前配制;其它试
剂的配制见P188。
3、试验结果的处理
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