文档介绍：新穿心莲内酯在体内外抗炎活性研究
选自:The American Journal of Chinese Medicine
Abstract
新穿心莲内酯,是一个来自穿心莲植物的一种提取物。本文主要研究新穿心莲内酯在体内和体外的抗炎作用及机制。研究发现口服新穿心莲内酯(150毫克/千克)显着抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀。口服新穿心莲内酯(100–150毫克/千克)也能减少醋酸致小鼠血管通透性增加。在体外进行研究,利用巨噬细胞系RAW -12-myristate-13-acetate刺激呼吸系统和脂多糖诱导产生一氧化氮、肿瘤坏死因子(肿瘤坏死因子-α)。
通过光学测量,结果显示新穿心莲内酯抑制有刺激因子刺激呼吸系统产生炎症因子,新穿心莲内酯抑制LPS诱导的巨噬细胞产生的一氧化氮和肿瘤坏死因子-α,促进抗炎活性的作用。这些结果表明,新穿心莲内酯具有显著的抗炎作用。
关键词:新穿心莲内酯;耳水肿;血管通透性;一氧化氮;肿瘤坏死因子-α;巨噬细胞炎症。
Materials and Methods
制备新穿心莲内酯的主要方法:冷浸法,干叶(1千克)被浸渍在95%乙醇在室温下保存三天。过滤后,乙醇溶液是在真空蒸发去除溶剂。残留(320克)浸膏用乙酸乙酯对水和乙酸乙酯部分(45克)在硅胶柱进行层析,洗脱用石油醚/***(7 : 3),产生2克纯新穿心莲内酯。新穿心莲内酯的化学结构鉴定红外,紫外,核磁共振和质谱等进行测定。其纯度大于96%,以高效液相色谱分析(图1)。该新穿心莲内酯溶解在二***亚砜(DMSO)存放在−20º的环境中。
其他化学试剂:醋酸豆寇酯、内***(脂多糖),青霉素,链球菌霉素,鲁米诺(苯巴比妥),三乙***和其他生化试剂等。醋酸豆寇酯溶解在DMSO中,脂多糖(50µ克/毫升)不是加入的磷酸缓冲溶液。都存放到-20ºC 的环境中。
实验动物:小白鼠(28±2克)
抗炎活性的新穿心莲内酯化学结构
实验三:新穿心莲内酯对LPS诱导的巨噬细胞中一氧化氮生产的影响
。然而,新穿心莲内酯在没有生产的巨噬细胞治疗内***的情况下是剂量依赖性地抑制内***(图4),在浓度从30到150µm。结果的基础上的微量细胞活力检测,新穿心莲内酯无毒性从30到90µm(细胞存活超过95%与对照组相比)。只有在最高剂量(150µm),一些细胞(细胞存活率明显低于65%与对照组相比)。
实验四:在LPS诱导的巨噬细胞下新穿心莲内酯对肿瘤坏死因子-α生产的影响。
肿瘤坏死因子-α是一个重要的炎症介质分泌的脂多糖,。图5显示,新穿心莲内酯从30到150µm,肿瘤坏死因子-α浓度在LPS处理组剂量依赖性减少,相比于对照组在无脂多糖诱导下。