Sanger测序原理.ppt

文档介绍：1977年,英国人Fred Sanger 发现,如果在DNA复制过程中掺入ddNTP,就会产生一系列末端终止的DNA链,并能通过电泳按长度分辨。
不同末端终止DNA链的长度是由掺入到新合成链上随机位置的ddNTP决定的。
由此诞生了以Sanger命名的测序原理即双脱氧链终止法测序原理。
Sanger简介
dNTP和ddNTP
o
H
o
P
H
CH2
碱基
H
OH
2’
3’
o
o-
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o-
2’-脱氧核糖核苷酸
H
H
o
H
o
P
H
CH2
碱基
H
H
2’
3’
o
o-
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o-
2’,3’-脱氧核糖核苷酸
H
H
双脱氧末端终止
o
H
H
CH2
A
H
OH
2’
3’
H
H
正常延伸
延伸终止
o
H
H
CH2
H
O
2’
3’
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o-
H
H
o
P
o
o-
磷酸二酯键
-
-
-
-
-
T
G
C
o
H
H
CH2
T
H
OH
2’
3’
H
H
o
H
H
CH2
H
2’
3’
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o
P
o
o-
o-
H
H
o
P
o
o-
磷酸二酯键
无法形成
-
-
-
-
-
A
C
G
H
dNTP