文档介绍：3
2
第 38卷分析化学( FENX I HUAXUE) 评述与进展第 6期
2010年 6月 Chinese Journal of Analytical Chem istry 909~914
DO I: 10. 3724 /SP. J. 1096. 2010. 00909
基于免疫胶体金标记技术的检测研究及其
在堆肥中的应用展望
赖萃曾光明黄丹莲冯冲凌胡霜
苏峰峰赵美花黄超危臻
2 2 (湖南2 大2 学环境科学与工程学院, 环境生物与控制教育部重点实验室, 长沙 410082)
摘要金纳米颗粒作为一种性能优异的标记物应用广泛。随后发展出来的免疫胶体金标记技术作为一种
3 2
灵敏度高、操作步骤简便、检测快速的免疫反应检测技术得到广泛关注。本文介绍了免疫胶体金标记技术的
基本原理、制备方法并详述了近年来该技术的新发展。此外,结合免疫胶体金标记技术在免疫检测与环境检
测实际工作中的应用,展望了其在堆肥环境检测中的应用潜力和发展前景。
关键词胶体金; 标记; 免疫检测; 堆肥; 评述
1 引言
堆肥被认为是将固体废物减量化、资源化的最佳途径[ 1 ] 。研究建立有效而实用的原位、在体、实
时、高灵敏度、高选择性的分析检测方法,用于检测与控制堆肥过程中生物组分及污染物,这是堆肥研究
中的关键技术。传统的堆肥分析检测方法常需要繁杂、冗长的萃取、提纯、浓缩、色谱分离等步骤,而且
试剂用量大,费用高[ 2 ] 。免疫胶体金标记技术是以胶体金为示踪标记物,应用于特异性抗原抗体反应
的一种新型免疫标记技术。胶体金具有纳米材料所特有的三大效应:表面效应、小尺寸效应和宏观量子
~
隧道效应,具有很大的比表面积,独特的光学、导电、导热等物理特性以及良好的生物相容性[ 3 5 ] ,可以
与蛋白质、核酸等非共价结合,且检测不依赖昂贵的激光检测仪器,只需普通光学仪器,甚至肉眼可辨。
另外免疫胶体金标记技术具有制作方便、价格低廉、容易操作、无放射性污染等优点,满足了现场快速环
境检测及实时监测等方面的要求。但是该技术在环境污染治理领域,特别是堆肥环境检测的应用起步
较晚,相关报道较少。本文通过评述免疫胶体金标记技术近年来的新发展及实际应用情况,特别是在环
境领域的应用进展来展望其在堆肥环境检测中的应用前景。
2 免疫胶体金标记技术的研究现状
2. 1 胶体金标记原理与制备
胶体金是氯金酸在还原剂的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静电作用形成一种稳定的胶
体状态,故称之为胶体金[ 6 ] 。在碱性条件下,胶体金颗粒表面带负电荷,可与目标蛋白质所带正电荷基
团之间形成非共价键的静电吸引而牢固结合,这种结合对所标蛋白的生物学活性无明显影响。吸附在
胶体金表面的抗原或抗体能定向将胶体金颗粒载运到组织或细胞内、固相载体上的相应抗体、抗原的位
置。由于金颗粒具高电子密度的特性,这些标记物在抗原抗体反应处聚集达到一定密度时(即金颗粒
107个/mm2 ) ,出现肉眼可见的粉红色斑点[ 7 ] 。
胶体金溶液的常见制备方法大致分为白磷还原法、硼氢化钠还原法、抗坏血酸盐还原法、柠檬酸三
钠还原法和鞣酸柠檬酸三钠还原法。其基本原理是向一定浓度的金溶液内加入适量还原剂, 使金